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更新時(shí)間:2024-08-02 21:00:07
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D-PBS緩沖液(不含鈣鎂和酚紅)
PBS緩沖液的作用
1.PBS是磷酸緩沖鹽溶液的簡稱,不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,對(duì)完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在適條件下參與生物反應(yīng),所以使用PBS是*。
PBS也不是的,有的生物活性物質(zhì)需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持佳的條件保證生物活性物質(zhì)保持其完整的特性。
2.PBS緩沖液能保持組織細(xì)胞需要的PH范圍.第二,其中所含的鹽濃度與體內(nèi)環(huán)境的相似,對(duì)組織細(xì)胞沒有毒性作用.用PBS洗細(xì)胞就是去掉培養(yǎng)基及其中所含的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的成分.PBS對(duì)試驗(yàn)結(jié)果沒有影響.當(dāng)然對(duì)細(xì)胞也無毒害.
D-PBS緩沖液(不含鈣鎂和酚紅)?
PBS緩沖液的配制:
方法一:
含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡稱為PBS-T)配制方法為:
1.稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),(NaCl),(KCl),吐溫-20 ,加水;
2.PBS:Phosphate Buffered Saline;
3.PBS 1L配方pH7.4:磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g;
4.磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g;
5.(NaCl):8g;
6.(KCl)0.2g;
7.加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙?,然后加入濃鹽酸調(diào)pH7.4,后定容到1L;
方法二:
母液的配制:
0.2M Na2HPO4:稱取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水
0.2M NaH2PO4:稱取 2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水
各種濃度
PB(pH=7.4)的配制:
先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后 只需將0.2M PB (pH=7.4)按相應(yīng)比例適當(dāng)稀釋即可,如: 0.1M PB(PH=7.4) :
取 500ml 0.2M PB,加水稀釋1000ml 即可。如:
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀釋 1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀釋 1000ml 即可。
若需要 NaCl的話,加入 NaCl 0.9%(g/100ml)即可。
方法三:PBS緩沖液
稱取8g NaC1、0.2g KCI、1.44g Na2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于900ml雙蒸水中,用鹽酸調(diào)pH值7.4,加水定容1L,常溫保存?zhèn)溆谩?/span>
另:其它各種另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 :
pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)
5.7 93.5 6.5
5.8 92 8
5.9 90 10
6.0 87.7 12.3
6.1 85 15
6.2 81.5 18.5
6.3 77.5 22.5
6.4 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 37.5
6.7 56.5 43.5
6.8 51 49
6.9 45 55
7.0 38 62
7.1 33 67
7.2 28 72
7.3 23 77
7.4 19ml 81ml
7.5 16 84
7.6 13 87
7.7 10.5 0.5
7.8 8.5 91.5
7.9 7 93
8.0 5.3 94.7
D-PBS緩沖液(不含鈣鎂和酚紅)
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