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上海嘉鵬
主營(yíng)產(chǎn)品： 超微量分光光度計(jì),核酸蛋白檢測(cè)儀,超微量紫外分光光度計(jì),nano光度計(jì),超微量核酸蛋白檢測(cè)儀 |
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2016-4-14 閱讀(3358)
1．選用的瓊脂糖：不同品牌的瓊脂糖在質(zhì)量上有較大的差異。劣質(zhì)瓊脂糖會(huì)導(dǎo)致DNA條帶模糊，甚至條帶缺失。因此請(qǐng)盡量選擇質(zhì)量穩(wěn)定可靠的品牌。
2．選擇適當(dāng)?shù)哪z濃度：
瓊脂糖凝膠的線性DNA分辨范圍
3．凝膠制備：配制凝膠和電泳應(yīng)選用相同的1x緩沖液；使用的容器體積至少是凝膠溶液的3倍，以免溶液沸騰時(shí)溢出；制膠過(guò)程中盡量趕除氣泡；根據(jù)樣品的濃度和體積選擇適當(dāng)大小的梳子。
4．選擇適當(dāng)?shù)碾娪揪彌_液：GenStar® SD緩沖液（Cat. No. E101-50）和TBE緩沖液適用于分離比較小的DNA片段，TAE緩沖液（Cat. No. E102-50）適用于分離比較大的DNA片段；緩沖液應(yīng)及時(shí)更新；膠回收純化應(yīng)使用新鮮配制的1x電泳緩沖液，以防核酸酶和DNA雜帶污染。
5．核酸樣品的準(zhǔn)備：提取的DNA樣品應(yīng)去除蛋白和多余的鹽分等雜質(zhì)；PCR樣品應(yīng)盡量在24小時(shí)內(nèi)電泳檢測(cè)，否則條帶容易模糊。
6．上樣緩沖液：所有泳道應(yīng)使用相同的上樣緩沖液，以防止因離子強(qiáng)度不同造成條帶遷移率偏差。
7．適量上樣：上樣過(guò)多會(huì)導(dǎo)致上樣孔超載，出現(xiàn)拖帶現(xiàn)象；上樣體積過(guò)小可能導(dǎo)致條帶亮度不均。
8．電壓及電泳時(shí)間：根據(jù)電泳槽型號(hào)、凝膠濃度、電泳緩沖液種類和目的條帶大小等選擇適當(dāng)?shù)碾妷汉碗娪緯r(shí)間。使用GenStar®SD電泳緩沖液時(shí)，電壓設(shè)置為20~35 v/cm膠長(zhǎng)；使用TAE或TBE緩沖液時(shí)，zui大電壓以不超過(guò)20 v/cm膠長(zhǎng)為宜。
上海嘉鵬科技有限公司專業(yè)生產(chǎn)：紫外分析儀、三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、暗箱三用紫外分析儀、暗箱紫外分析儀、手提式紫外分析儀、三用紫外分析儀暗箱式、紫外檢測(cè)儀、部分收集器、恒流泵、蠕動(dòng)泵、凝膠成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng)、化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng)、光化學(xué)反應(yīng)儀、旋渦混合器、漩渦混合器、玻璃層析柱、梯度混合器、梯度混合儀、核酸蛋白檢測(cè)儀、玻璃層析柱、熒光增白劑測(cè)定儀、餾分收集器、切膠儀、藍(lán)光切膠儀、層析系統(tǒng)等產(chǎn)品。咨詢。
