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紅色熒光標記人源乙酰化低密度脂蛋白產(chǎn)品簡介:
LDL是由極低密度脂蛋白(VLDL)轉(zhuǎn)變而來,主要功能是把Cholesterol運輸?shù)饺砀魈幖毎?,運輸?shù)礁闻K合成膽酸,其可用于研究受體介導的內(nèi)吞作用過程,尤其是在動脈粥樣硬化等疾病中,其血漿來源的LDL可用于研究LDL在功能和代謝中的氧化作用。
乙酰化的LDL是修飾LDL中的一類,LDL含有未修飾的載脂蛋白,可以用來研究正常Cholesterol的轉(zhuǎn)運和內(nèi)吞作用。當LDL載脂蛋白的賴氨酸殘基被乙?;揎椇?,LDL復合物不再與LDL受體結(jié)合,但是,修飾型LDL更容易與內(nèi)皮細胞和小膠質(zhì)神經(jīng)細胞的“scavenger"受體結(jié)合。因此,Ac-LDL可用來研究上述細胞的功能。
人源乙?;兔芏戎鞍祝℉uman Acetylated Low Density Lipoprotein, Human Ac-LDL),來自健康人源血漿LDL,Hepatitis C,HIV-I和HIV-II抗體檢測均為陰性。
本品為紅色熒光標記人源乙?;兔芏戎鞍?/strong>(Human DiI-Ac-LDL),是標記熒光探針DiI(1,1-dioctadecyl-3,3,3,3- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate)的Ac-LDL。當DiI-Ac-LDL標記細胞后,在溶酶體酶的作用下,脂蛋白被降解,而DiI在細胞內(nèi)膜聚集,從而可以用來檢測修飾型LDL的吸收情況??梢杂脕順擞浹軆?nèi)皮細胞、巨噬細胞和內(nèi)皮祖細胞(EPC),可用來鑒定并分選這些細胞,以及用來研究不同細胞系對修飾化LDL的內(nèi)吞作用。我司提供的DiI-Ac-LDL,每個批次均經(jīng)過牛大動脈內(nèi)皮細胞和小鼠巨噬細胞的標記檢測來評估產(chǎn)品的標記特異性,從而保證結(jié)果的一致性。
產(chǎn)品屬性:
純度:>98%
濃度:0.8-3.0 mg/ml 此款產(chǎn)品為2.5mg/ml(Protein)
外觀:乳狀液體
緩沖液組分:0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4
運輸與保存方法:冰袋運輸。4℃保存,建議避光,6周穩(wěn)定。千萬不可凍存
實驗步驟:
1. 在生長培養(yǎng)基中將DiI-Ac-LDL稀釋至20-50ug/ml;
2. 將其加入到細胞中37 oC溫育4小時;
3. 去掉培養(yǎng)基;
4. 用無探針的緩沖液沖洗;
5. 通過熒光顯微鏡觀察并/或者將細胞通過Trypsin(或者EDTA)進行分類;
6. 熒光顯微鏡:用標準羅丹明激發(fā)進行觀察 (或者建議用波長激發(fā):549nm、發(fā)射:565nm)。如果需要,用3%甲醛在PBS中固定。切勿使用甲醇或丙酮進行固定,因為DiI溶于有機溶劑。
注意事項:
1本品的稀釋工作液極不穩(wěn)定,建議即配即用;
2長期貯存可能會有沉淀析出,屬于正?,F(xiàn)象,低速離心2 min去除沉淀即可使用;
3為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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