微孔板化學發(fā)光分析儀的分析流程你了解嗎?
化學免疫發(fā)光分析又稱化學發(fā)光免疫分析(CL IA ) ,是用化學發(fā)光劑直接標記抗原或抗體的免疫分析方法?;瘜W發(fā)光免疫分析儀包含兩個部分, 即免疫反應系統(tǒng)和化學發(fā)光分析系統(tǒng)?;瘜W發(fā)光分析系統(tǒng)是利用化學發(fā)光物質經催化劑的催化和氧化劑的氧化, 形成一個激發(fā)態(tài)的中間體, 當這種激發(fā)態(tài)中間體回到穩(wěn)定的基態(tài)時, 同時發(fā)射出光子(hM) , 利用發(fā)光信號測量儀器測量光量子產額。免疫反應系統(tǒng)是將發(fā)光物質(在反應劑激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體) 直接標記在抗原(化學發(fā)光免疫分析) 或抗體(免疫化學發(fā)光分析) 上, 或酶作用于發(fā)光底物。
微孔板化學發(fā)光分析儀廣泛用于腫瘤標志物、激素等免疫類項目的檢測,采用*的磁性微粒子技術、超靈敏度光電倍增管及穩(wěn)定的放大系統(tǒng),具有高靈敏度、高穩(wěn)定性、高準確性的特點。
微孔板化學發(fā)光分析儀工作原理
化學發(fā)光免疫分析儀以磁性微粒子為載體,以堿性磷酸酶為標記物,采用夾心法或競爭結合法,以發(fā)光底物AMPPD為基礎進行免疫檢測。
微孔板化學發(fā)光分析儀的工作流程:
主探針吸取標本、試劑和磁性微粒并注入RV(反應)管中。稀釋混合后的RV管被傳送入孵育帶進行孵育,以加速抗原與抗體的結合,并終形成固相包被(即抗體-抗原-酶標抗體復合體),接著RV管被送入清洗轉盤洗滌2~3次,此期間磁性微粒包被在電磁場的作用下被吸附在RV管一側以進行清洗,其未結合多余成分被吸出并排走。
清洗好后,由基質液泵和基質液閥吸入發(fā)光底物AMPPD,并分配到RV管中,再次孵育以加強信號,此期間磁性粒子表面的堿性磷酸酶在催化作用下產生處于激發(fā)態(tài)的間氧苯甲酸甲酯陰離子,當該陰離子回到基態(tài)時會產生470nm的光,并被光電管檢測而終產生結果。