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蛋白純化儀使用常見的一些問題解決辦法
蛋白純化怎么提純，蛋白是大分子，和各種分子大小不同的白蛋白，有使用一些更簡單的方法，以在蛋白質(zhì)和小分子材料，并且還分離的蛋白質(zhì)混合物中分離出來。分離不同分子大小的蛋白質(zhì)主要是透析，超濾，凝膠過濾，離心分離等的方法。透析和超濾通常用于蛋白質(zhì)分離方法。待分離的透析混合物放置在由半透膜的透析袋，然后浸入在透析液分離。超濾是通過半透膜中使用的離心力或壓力的水和其他小分子，并截留在所述半透膜的過程中的蛋白質(zhì)。
蛋白純化儀純化方式是什么：
1、沉淀。
2、電泳：帶電蛋白質(zhì)是高于或低于它的等電點，在電場中可被移動到負電極或電場的正電極。支撐有薄膜電泳，電泳等。
3、透析：利用兩個透析袋把大分子進行蛋白質(zhì)與小分子有機化合物可以分開的方法。
4、層析：離子交換色譜，利用蛋白質(zhì)的自由性質(zhì)，特定的PH下，蛋白質(zhì)的電荷量和性質(zhì)不同，可以用離子交換色譜分離。陰離子交換色譜，負功率小的蛋白質(zhì)首先被洗脫。分子篩，也稱為凝膠過濾。細小的蛋白質(zhì)進入毛孔，并在里面停留很長時間。大的蛋白質(zhì)不能進入毛孔并直接流出。
5、蛋白純化儀純化方式是什么，超速離心：蛋白質(zhì)純化可用于確定分子量可以用作所述蛋白質(zhì)。其形成不同密度不同的蛋白質(zhì)是分離的。
蛋白純化儀的使用小技巧：
基線走不平
基線上飄？下飄？上下波動？
解決辦法：
基線走不平通常是因為紫外流通池卡住小氣泡，這時候使用儀器較大流速10%~20%的流速沖洗儀器幾分鐘到十幾分鐘，基線基本就乖乖聽話了哦！
壓力過大
有些實驗所用層析柱子耐壓比較小，為了保護柱子就需要我們減小系統(tǒng)壓力。由于進樣閥和紫外流通池都具有較大的壓力，可以選擇泵頭上樣，這時候管路可以不連接進樣閥及其他非必需部件。
換液進氣泡
在使用泵頭上樣過程中，更換緩沖液時如何確保管路外接口不進氣泡？
解決辦法：把上樣泵頭入口放置低于廢液出口水平面，學(xué)好物理還是有用滴！
莫名其妙柱子就干了
你是否遇到過實驗進程很順利，柱子卻突然干掉，而檢查各管路及接頭卻沒有松動？那么很有可能是儀器使用時間稍長有雜質(zhì)污染了泵后單向閥，導(dǎo)致A、B兩泵之間液體可以互流。這個問題可以通過抽其中一個泵的抽液閥，觀察另一個泵進樣管路里的液體是否隨之流動來確定。
自己動手拆卸零件？太復(fù)雜！勞煩工程師修理換件？快也要半天或一天能解決好。那么如何不影響實驗進程？答案很簡單，實驗前把A、B兩泵同時充滿水，后面換液時只要保證不用的那個泵也充滿液體就可以了。做了這個小小的改變，柱子再也不莫名其妙的干了。