CCK-8細胞增殖-毒性檢測試劑盒日本同仁
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CCK-8法與普通的MTT法相比,具有顯著特點:
★靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠,重現(xiàn)性好
★操作簡便,省時省力
★水溶性,不需要換液,尤其適合于懸浮細胞
★無需放射性同位素和有機溶劑,對細胞毒性低
★為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用
★適合于高通量藥物篩選
CCK-8用途:藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗
CCK-8試劑盒在國內(nèi)科研院所、重點大學(xué)、*醫(yī)院被廣泛應(yīng)用,認可度高,使用CCK-8發(fā)表的中外文獻達600多篇,其中截止08年底SCI影響因子IF>10分的論文有37篇,zui高IF38.5分
CCK-8 檢測步驟
1. 向各孔中加入100 μl細胞懸液。a)
2. 在37℃下預(yù)孵育培養(yǎng)板。b)
3. 向各孔中加入各濃度的待測溶液c)10 μl。
4. 37℃下孵育。
5. 向各孔中加入10 μl的CCK-8溶液d)。
6. 37℃下孵育1-4小時。e)
7. 測定450 nm處的OD值。
CCK-8細胞增殖-毒性檢測試劑盒日本同仁
a) 使用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基制備50,000-100,000個/ml的細胞懸液。
b) 建議使用CO2培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)。
c) 使用培養(yǎng)基或PBS來制備溶液。
d) 如果待測溶液有還原性,測定不含細胞,但含有CCK-8的待測溶液在450 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入CCK-8 ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的100 μl培養(yǎng)基和10 μl CCK-8進行檢測。
e) 白細胞可能需要培養(yǎng)較長時間。
活力計算
細胞活力*(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[A(0加藥)-A(空白)] ×100
A(加藥):具有細胞、CCK-8溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培養(yǎng)基和CCK-8溶液而沒有細胞的孔的吸光度
A(0加藥):具有細胞、CCK-8溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
*細胞活力:細胞增殖活力或細胞毒性活力