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我司全程提供細胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應用、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息,我們專業(yè)您的細胞系實驗,讓您實驗再無煩擾!產品僅用于科研
名稱 DC細胞
產品概述
DC細胞,即樹突狀細胞(Dendritic Cell)是正常人體內存在的一種具有強大的抗原提呈功能的一類特殊的細胞,被喻為機體的“天然佐劑"。2011年10月3日,瑞典卡羅琳醫(yī)學院在斯德哥爾摩宣布,2011年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎授予加拿大科學家拉爾夫·斯坦曼、生于盧森堡的法國籍科學家朱爾斯·霍夫曼以及美國科學家布魯斯·博伊特勒,以表彰他們在免疫學領域取得的革命性研究成果。其中,斯坦曼(RalphM·Steinman)教授,因其在免疫系統(tǒng)領域以及樹突狀細胞(Dendritic cell簡稱DC)等一系列研究發(fā)現,獨享獎金的一半,另外一半由其他兩位科學家分享。被譽為“DC細胞之父"的斯坦曼教授在2006年就查出胰腺癌晚期。在醫(yī)學上,晚期胰腺癌的惡化程度高,生存期不會超過6個月。然而,斯坦曼教授正是在接受了以他自己的研究成果“樹突細胞"(DC細胞)為依據的細胞后,成功地將生命延長。
DC細胞抗腫瘤機制如下:
a)DC可以高表達MHC-Ⅰ類和MHC-Ⅱ類分子,MHC分子與其捕獲加工的腫瘤抗原結合,形成肽-MHC分子復合物,并遞呈給T細胞,從而啟動MHC-I類限制性CTL反應和MHC-Ⅱ類限制性的CD4+Thl反應。同時,DC還通過其高表達的共刺激分子(CD80/B7-1、CD86/B7-2、CD40等)提供T細胞活化所必須的第二信號,啟動了免疫應答。
b)DC與T細胞結合可大量分泌IL-12、IL-18激活T細胞增殖,誘導CTL生成,主導Th1型免疫應答,利于腫瘤清除;激活穿孔素P顆粒酶B和FasL/Fas介導的途徑增強NK細胞毒作用;
c)DC分泌趨化因子(Chemotactic Cytokines,CCK)專一趨化初始型T細胞促進T細胞聚集,增強了T細胞的激發(fā)。保持效應T細胞在腫瘤部位長期存在,可能通過釋放某些抗血管生成物質(如IL-12、IFN-γ)及前血管生成因子而影響腫瘤血管的形成。上述CCK進一步以正反饋旁分泌的方式活化DC,上調IL-12及CD80、CD86的表達;同時DC也直接向CD8+T細胞呈遞抗原肽,在活化的CD4+T細胞輔助下使CD8+T細胞活化,CD4+和CD8+T細胞還可以進一步通過分泌細胞因子或直接殺傷,增強機體抗腫瘤免疫應答。
DC刺激免疫反應有以下特點:
1.樹突狀細胞(DC)是人體內功能強的專職抗原遞呈細胞,DC相當于信使,將抗原信息傳遞給T細胞,并具有活化T細胞的功能,很少量就可以激發(fā)強大的T細胞反應。
2.可致敏輔助T細胞的多種細胞因子,顯著刺激初始型T細胞增殖,以激活體內靜止狀態(tài)的初始型T細胞(而巨噬細胞、B細胞僅能刺激已活化的或記憶性T細胞)。
3.幫助重建腫瘤患者對腫瘤細胞的免疫監(jiān)視功能。機體的免疫系統(tǒng)具有完備的監(jiān)視功能,但腫瘤細胞對機體的免疫系統(tǒng)有抵抗和抑制作用,使得免疫細胞不能識別和殺傷腫瘤細胞。在DC疫苗培養(yǎng)中用腫瘤抗原誘導DC使其致敏后,可將其抗原信息傳遞給T細胞,使T細胞重新識別和殺傷腫瘤細胞。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
細胞分裂周期調控蛋白45抗體
細胞分裂周期蛋白CDC123抗體
鋅指蛋白830抗體
中心體蛋白質76抗體
中心體蛋白152抗體
人γ分泌酶elisa檢測試劑盒
人γ氨基丁酸(GABA)elisa檢測試劑盒
人β-轉導素重復序列包含蛋白(BTRC)elisa檢測試劑盒
人β抑制蛋白2(ARRB2)elisa檢測試劑盒免費代測
人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)elisa檢測試劑盒
DC細胞小鼠肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)elisa分析檢測試劑盒
小鼠肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)elisa檢測試劑盒
小鼠肺部活化調節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)elisa分析檢測試劑盒
小鼠肺部活化調節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)elisa檢測試劑盒
小鼠肺部激活調節(jié)趨化因子(PARC)elisa檢測試劑盒
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。