詳細(xì)介紹
人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Human L-Lactate Dehydrogenase,L-LDH ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
英文名稱:Human L-Lactate Dehydrogenase,L-LDH ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
DBD-CO-Hz英文名稱:DBD公司赫茲CAS號(hào):179951-63-4分子式:328.35分子量:C11H16N6O4S
苯并四咪唑英文名稱:苯并四咪唑CAS號(hào):885051-07-0分子式:252.34分子量:C15H12N2S
2-溴-4-硝基咪唑英文名稱:2溴-4-硝基咪唑CAS號(hào):65902-59-2分子式:191.97分子量:C3H2BrN3O2
4-碘1H-咪唑英文名稱:4碘1H-咪唑CAS號(hào):71759-89-2分子式:193.97分子量:C3H3IN2
1,1-硫酰二咪唑英文名稱:1,1-硫酰二咪唑CAS號(hào):45645分子式:分子量:
2-異丙基-4-甲噻唑英文名稱:2-isopropyl-4-methylthiazoleCAS號(hào):15679-13-7分子式:141.23分子量:C7H11NS
硝酸布康唑英文名稱:NitricacidCAS號(hào):64872-77-1分子式:474.79分子量:C19H18Cl3N3O3S
三環(huán)唑英文名稱:ThreeringCAS號(hào):41814-78-2分子式:189.24分子量:C9H7N3S
5--1,2,3-噻二唑英文名稱:5--1,2,3-twoCAS號(hào):4100-41-8分子式:101.13分子量:C2H3N3S
3,5-二甲-4-硝基吡唑英文名稱:3,5-twomethyl-4-nitrogroupCAS號(hào):14531-55-6分子式:141.13分子量:C5H7N3O2
N-乙基咔唑英文名稱:N-ethylcarbazoleCAS號(hào):86-28-2分子式:195.26分子量:C14H13N
2-甲硫基-6-甲苯并惡唑英文名稱:2-methylthiomethyl-6-benzoxazoleCAS號(hào):439608-30-7分子式:179.24分子量:C9H9NOS
2,1,3-苯并噻二唑英文名稱:2,1,3-benzeneandtwoCAS號(hào):273-13-2分子式:136.17分子量:C6H4N2S
氯1-辛基-3-甲咪唑英文名稱:1---3-methylimidazolechlorideCAS號(hào):64697-40-1分子式:230.78分子量:C12H23ClN2pXJ002香菇 Lactarius camphoratus
Tris Buffered Saline(TBS),10XBABL/C小鼠胚胎成纖維細(xì)胞英文名稱:BABL/3T3
人泛素蛋白(Ub)ELISA Kit釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
大腸桿Rosetta Blue(DE3)種紫紅曲霉 Monascus purpureus
pGEX-2TK(pGEX2TK)(60908-3760)人骨骼肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
豬低分子肝素(LMWH)ELISA Kit786-O [786-0], 人腎透腺細(xì)胞 Human
兩B鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
pSV3-dhfr(pSV3dhfr)蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
Southgate胭脂紅染色法粘多糖染色試劑盒TE-10(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人促黃體激素(LH)ELISA Kit意大利酵母 Saccharomyces italicus
T5 medium葫蘆科刺盤孢 Colletotrichum lagenarium
pET-23a(+)(pET23a)(60908-2787)y金黃地鼠皮膚成纖維細(xì)胞英文名稱:GHS1
小鼠巨噬細(xì)胞集落激因子(M-CSF)ELISA Kit 細(xì)胞名稱 種屬
dTTP溶液,2.5 mM(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)野油菜黃單胞菌 Xanthomonas campestris
pRL-null(pRLnull)(60908-5925)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
HCl Buffer,1.0M,pH6.5IM-9(人外周血B淋巴細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
雞主要組織相容復(fù)合體(MHC/B)ELISA Kit瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus
Mixotrophic nitrobacter medium,10%豐加鏈霉菌灰白亞種 Streptomyces toyocaensis subsp. Incanus
pCMV6-AC-GFP(pCMV6ACGFP)(60908-1951)y大鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞100mL
兔子白介素1可溶受體I (IL-1sR Ⅰ)ELISA Kit釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法電泳甘油(100 mL)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
氟曲嗎唑英文名稱:FlutrimazoleMazuoCAS號(hào):119006-77-8分子式:346.37分子量:C22H16F2N2
甲硝唑英文名稱:MetronidazoleCAS號(hào):443-48-1分子式:171.15分子量:C6H9N3O3
1-甲?;溥蛴⑽拿Q:1-aCAS號(hào):3197-61-3分子式:96.09分子量:C4H4N2O
1-甲咪唑英文名稱:1-methylgroupCAS號(hào):616-47-7分子式:82.1分子量:C4H6N2
2-巰基-5-甲氧基-1H-苯并咪唑英文名稱:2-mercapto-5-methoxy-1H-benzimidazoleCAS號(hào):37052-78-1分子式:180.23分子量:C8H8N2OS