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詳細(xì)介紹
人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)elisa試劑盒操作步驟 英文名稱：human mixed lineage kinase domain-like,MLKL ELISA Kit 檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
英文名稱：human mixed lineage kinase domain-like,MLKL ELISA Kit
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途：科研與實(shí)驗(yàn)試劑，不得用于臨床診斷。
標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時(shí)備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右，通過(guò)反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或 者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)elisa試劑盒操作步驟操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個(gè)濃度）、空白孔、待測(cè)樣品組。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。
注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)?jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn)，可和所購(gòu)經(jīng)銷(xiāo)商， 如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)elisa試劑盒操作步驟安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4-(N,N-二甲磺酰)-7-嗪并氧雜惡二唑英文名稱：4-（N，N-二甲磺酰）-7-嗪并氧雜惡二唑CAS號(hào)：139332-64-2分子式：311.36分子量：C12H17N5O3S
N--3-(4-溴)咔唑英文名稱：N-3-（4-溴）咔唑CAS號(hào)：1028647-93-9分子式：397.9分子量：C24H16NBr
2,4,5-*惡唑英文名稱：2,4,5-*惡唑CAS號(hào)：20662-84-4分子式：111.14分子量：C6H9NO
4,5-二氯咪唑英文名稱：4,5-二氯咪唑CAS號(hào)：15965-30-7分子式：136.97分子量：C3H2Cl2N2
腈菌唑英文名稱：腈菌唑CAS號(hào)：88671-89-0分子式：288.78分子量：C15H17ClN4
2-甲噻唑英文名稱：2-methylthiazoleCAS號(hào)：3581-87-1分子式：99.15分子量：C4H5NS
硝酸奧昔康唑英文名稱：NitricacidandnitricacidCAS號(hào)：64211-46-7分子式：429.13分子量：C18H13Cl4N3O
3--1H-1,2,4-三氮唑英文名稱：3-three-1H-1,2,4-CAS號(hào)：61-82-5分子式：84.08分子量：C2H4N4
3-甲-5異噁唑英文名稱：3-methyl-5aminoisoxazoleCAS號(hào)：14678-02-5分子式：98.1分子量：C4H6N2O
6-硝并噻唑英文名稱：6-nitrobenzeneandthiazoleCAS號(hào)：2942/6/5分子式：506.52884分子量：C22H26N4O8S
3-甲-5-對(duì)甲-1H-吡唑英文名稱：3-methyl-5-tomethylphenyl-1H-CAS號(hào)：90861-52-2分子式：分子量：C11H12N2
1-(4-芐)吡唑英文名稱：1-(4-)CAS號(hào)：142335-61-3分子式：173.21分子量：C10H11N3
4,5-二碘-1H-咪唑英文名稱：4,5-two-1H-CAS號(hào)：15813-09-9分子式：319.87分子量：C3H2I2N2
2-辛并咪唑英文名稱：2-octylbenzimidazoleCAS號(hào)：13060-24-7分子式：230.35分子量：C15H22N2
二羥丙咪唑英文名稱：DihydroxypropylimidazoleCAS號(hào)：分子式：分子量：
泰妥拉唑英文名稱：Tai,ThaiCAS號(hào)：113712-98-4分子式：368.39分子量：C16H17N4NaO3S
1-乙咪唑英文名稱：1-ethylCAS號(hào)：7098/7/9分子式：96.13分子量：C5H8N2
N-(4-溴)咔唑英文名稱：N-(4-Bromophenyl)carbazoleCAS號(hào)：分子式：分子量：
1-(2-二甲乙)-1H-5-巰-四氮唑英文名稱：1-(2-twomethylaminoethyl)-1H-5-mercaptotetrazoleCAS號(hào)：61607-68-9分子式：173.24分子量：C5H11N5S lovo, 人結(jié)腸細(xì)胞 Human
異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
BT-474(人腺導(dǎo)管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
紫芝 Ganoderma japonicum
芽胞桿菌 Bacillus sp.
COLO全細(xì)胞裂解液100μg100μg
藍(lán)微褐鏈霉菌 Streptomyces cyaneofuscatus
人皮膚成纖維樣細(xì)胞英文名稱：HSF
MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞
異常漢遜酵母 Hansenula anomala
亞側(cè)耳 Hohenbuehelia serotina
AtT-20(小鼠垂體瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
紅曲霉 Monascus anka
人高轉(zhuǎn)移肺細(xì)胞英文名稱：95-D
SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺細(xì)胞 Human
鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
SW 1353(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
溝腸桿菌 Enterobacter cloacae
牛糞枝孢 Cladosporium stercorarium
人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)elisa試劑盒操作步驟膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞（EGFP標(biāo)記） Mouse
異常畢赤酵母 Pichia anomala
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
HPAC(人胰腺腺泡上皮)5×106cells/瓶×2
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