詳細(xì)介紹
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟 英文名稱:Human nitric oxide,NO ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
英文名稱:Human nitric oxide,NO ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過(guò)反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度)、空白孔、待測(cè)樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),可和所購(gòu)經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
OP9(小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
桿菌屬 Lactobacillus sp.
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
TE-10(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
猴菌
膠凍樣芽胞桿菌 Bacillus mucilaginosus
DU 145(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
大腸桿菌 Escherichia coli
eECL Western Blot Kit/高靈敏度化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒250ml25ml、100ml、250ml
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
天藍(lán)色鏈霉菌 Streptomyces coelicolor
草魚(yú)胚胎細(xì)胞英文名稱:CP-88
宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.
側(cè)耳 Pleurotus sp.
細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒規(guī)格:200次
EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞
煙曲霉 Aspergillus fumigatus
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 LIFR/CD118 白病抑制因子受體抗體規(guī)格: 0.1ml
PIBF1/C13orf24 孕酮誘導(dǎo)阻斷因子1抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-dog IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗狗IgG規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118) 磷酸化雌激素受體α抗體規(guī)格: 0.1ml
DFFB DNA斷裂因子抗體(蛋白酶激活脫氧核糖核酸酶)規(guī)格: 0.2ml
Nuclear Matrix Protein p84/NMP84 核基質(zhì)p84蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Matriptase 2 膜型絲氨酸蛋白酶2抗體規(guī)格: 0.2ml
RARRES1/TIG1 視黃酸受體應(yīng)答蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml
CD1a/Cortical thymocyte antigen CD1A T淋巴細(xì)胞CD1抗體規(guī)格: 0.1ml
WISP1 Wnt1信號(hào)通路蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-Dnmt1(Tyr969) 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體規(guī)格: 0.1ml
DIS/CCAR1 細(xì)胞周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-p63 (Ser160/Ser162) 磷酸化P63瘤抑制基因抗體規(guī)格: 0.1ml
Cyclooxygenase 3/Cox3 前列素過(guò)氧化物合成酶3抗體規(guī)格: 0.2ml
PLC beta 3 磷酯酶Cβ3抗體規(guī)格: 0.1ml
C5a 過(guò)敏毒素C5a(補(bǔ)體C5a)抗體規(guī)格: 0.2ml
MTSS1 瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1規(guī)格: 0.2ml
JAM1 連接粘附分子1抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-PRKD3(Ser41) 磷酸化蛋白激酶C nu型抗體規(guī)格: 0.1ml
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟 NF66/alpha Internexin α-中連蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Neurturin 神經(jīng)生因子抗體規(guī)格: 0.1ml
C20orf194 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框194抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc規(guī)格: 0.1ml
phospho-APBB1 (Ser347) 磷酸化鐵蛋白Fe65抗體規(guī)格: 0.1ml
ENPP1 核苷酸內(nèi)焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體規(guī)格: 0.2ml