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          人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)elisa試劑盒操作步驟

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          • 品牌 R&D/美國(guó)
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2017-03-09 13:47:42瀏覽次數(shù):230

          聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          用途:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測(cè)細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)elisa試劑盒操作步驟的含量。

          詳細(xì)介紹

          人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱:Human erythrocyte membrane protein,EMP ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
          英文名稱:Human erythrocyte membrane protein,EMP ELISA Kit 
          規(guī)格:96T/48T
          主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
          性狀:盒裝液體
          人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷。
          標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
          種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
          人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
          1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
          2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
          3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
          人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
          1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
          2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
          3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
          4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
          5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
          6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
          7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
          8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
          人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
          1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
          2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度)、空白孔、待測(cè)樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
          3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
          4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
          5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
          6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
          7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 50ul 后,再加入顯色劑 B 50ul
          8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。 
          注意事項(xiàng):
          1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
          2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
          3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
          4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
          5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
          6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問,可和所購(gòu)經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
          人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)elisa試劑盒操作步驟安全性
          1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
          2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
          3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

          UBE2J2  泛素蛋白連接酶J2抗體規(guī)格: 0.2ml

          BTBD19  BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白19抗體規(guī)格: 0.2ml

          KNDC1  腦蛋白9抗體規(guī)格: 0.2ml

          Luciferase  熒光素酶抗體規(guī)格: 0.2ml

          NFkB p105/p50  細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體規(guī)格: 0.1ml

          NKA  神經(jīng)激肽A抗體規(guī)格: 0.1ml

          Phospho-eNOS (Thr113)  磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內(nèi)皮型)規(guī)格: 0.1ml

          beta Bax/BCL2 associated X protein  BCL2相關(guān)X蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

          TUSC2  小板源性生因子A相關(guān)蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml

          MAGEE1/MAGEC2  黑色素瘤相關(guān)抗原C2抗體規(guī)格: 0.2ml

          phospho-Syndecan 4(Ser179)  磷酸化多配體聚糖4(Ser179)抗體規(guī)格: 0.1ml

          Calcineurin A/PP-2B alpha 1  鈣調(diào)磷酸酶抗體規(guī)格: 0.1ml

          RHOBTB1  Rho相關(guān)結(jié)構(gòu)域BTB蛋白質(zhì)1抗體規(guī)格: 0.2ml

          KLF4  腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體規(guī)格: 0.1ml

          RBP/Retinol binding protein  視黃醇結(jié)合蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

          MT-ND1  NADH復(fù)合體1抗體規(guī)格: 0.2ml

          C20orf111  過氧化氫誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

          Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc規(guī)格: 0.1ml

          FBP2  肌肉果糖二磷酸酶抗體規(guī)格: 0.1ml

          TGF beta 1/LAP  轉(zhuǎn)化生因子β(TGFβ)抗體規(guī)格: 0.1ml Hut-102(人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

          香菇 Lentinula edodes

          人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

          人直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

          毛霉屬 Mucor sp.

          短短芽胞桿菌 Brevibacillus brevis

          H22(小鼠肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          日本根霉

          人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤(腦轉(zhuǎn)移)英文名稱:KP-N-NS

          WM35, 人黑色素瘤細(xì)胞

          嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

          香菇 Lentinula edodes

          Caov-3(人突狀卵巢腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          馬杜拉放線菌 Actinomadura sp.

          人脈絡(luò)膜血管細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

          mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          諾爾斯鏈霉菌 Streptomyces noursei

          A549/DDP, 人肺腺耐藥細(xì)胞株

          人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)elisa試劑盒操作步驟釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          玉蜀黍赤霉 Gibberella zeae

          人肺細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)英文名稱:NCI-H292

          HBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系 Human

          牛鏈球菌 Streptococcus bovis

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