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          兔脊髓神經(jīng)元細胞

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          • 型號
          • 品牌 R&D/美國
          • 廠商性質 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-11 11:40:20瀏覽次數(shù):242

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X0900 應用領域 化工
          主要用途 僅供科研使用    
          兔脊髓神經(jīng)元細胞公司其它各種產(chǎn)品G2期/S期應答相關蛋白1抗體 卷曲螺旋結構域蛋白28A抗體
          鳥苷酸還原酶1抗體 卷曲螺旋結構域蛋白25抗體
          G蛋白偶聯(lián)受體C5家族亞型D抗體 卷曲螺旋結構域蛋白23抗體
          G氨基受體δ/GABAA Rδ抗體 卷曲螺旋結構域蛋白21抗體
          G氨基受體γ1/GABAA Rγ1抗體 卷曲螺旋結構域蛋白18抗體

          詳細介紹

          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          兔脊髓神經(jīng)元細胞

          規(guī)格

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號

          GOY-01X0900

          名稱    兔脊髓神經(jīng)元細胞
          2.組織來源:脊髓組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

          4.細胞簡介:

          兔脊髓神經(jīng)元細胞分離自脊髓組織;脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結構,位于脊柱的椎管內且被脊椎保護;是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H(蝴蝶型)灰質區(qū),主要由神經(jīng)細胞構成;在灰質區(qū)周圍為白質區(qū),主要由有髓神經(jīng)纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應的31節(jié),31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)系統(tǒng)基本的結構和功能單位是神經(jīng)元,即神經(jīng)細胞,其大小和外觀在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體,內含神經(jīng)絲、微管、內質網(wǎng)、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大神經(jīng)元突起的粗面內質網(wǎng)可用Nissl染色顯示,在光鏡下是灰藍色斑塊狀,稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經(jīng)元的突起,能在神經(jīng)元之間傳遞電沖動,突起的大小和形態(tài)各不相同,很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。脊髓組織內含有大量膠質細胞,神經(jīng)元含量少,分離純化難度大,且脊髓神經(jīng)元細胞是高度分化的終末細胞,不能分裂增殖,培養(yǎng)要求高。剛接種的脊髓神經(jīng)元呈圓形,體積小,透亮,無突起。培養(yǎng)2-3d,可見胞體增大,突起增多延長;培養(yǎng)6-7d,細胞體大飽滿,突起明顯增加延長并交織成網(wǎng),光暈明顯,立體感強。培養(yǎng)20d后,死亡細胞明顯增加,細胞出現(xiàn)內空泡,突起粗細不均,甚至脫壁,發(fā)生細胞崩解。

          5.方法簡介:

          公司實驗室分離的兔脊髓神經(jīng)元細胞采用膠原酶&聯(lián)合消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結合化學試劑抑制法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質量檢測:

          公司實驗室分離的兔脊髓神經(jīng)元細胞經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          包被條件 PLL0.1mg/ml

          培養(yǎng)基 B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin

          換液頻率 2-3天換液一次

          生長特性 貼壁

          細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣

          傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

          消化液 0.25%

          培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

          圖片13.jpg

          冷凍保存細胞之方法?
          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
          培養(yǎng)操作:
          1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
          2
          )細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
          1.
          棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
          2.
          1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
          3.
          6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
          4.
          將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3
          )細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
          1.
          細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
          2. 4 min 1000rpm
          離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
          3.
          將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
          實驗報告:
          產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
          1
          、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將成1mm3左右大??;
          2
          、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
          3
          、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
          4
          、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
          5
          、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
          二、免疫熒光鑒定:
          1
          、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
          2
          、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
          3
          、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
          4
          、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
          5
          、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
          6
          、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
          凍干粉   多頭被孢

          食酸菌   小被孢霉

          蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae   深黃被孢霉

          頂青霉   流感嗜血桿菌ATCC49247凍干粉

          平蓋靈芝(樹舌)   綠膿假單胞菌(綠膿桿菌)
          大鼠蘭尼定受體1(RYR1)elisa檢測試劑盒

          大鼠賴氨酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)elisa檢測試劑盒

          大鼠醌NADH脫氫酶1(NQO1)elisa檢測試劑盒

          大鼠跨膜蛋白27(TMEM27)elisa檢測試劑盒

          大鼠克拉拉細胞蛋白16(CC16)elisa檢測試劑盒
          兔脊髓神經(jīng)元細胞EB病毒核抗原1(EBNA1)抗體(IgG)elisa分析檢測試劑盒

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