詳細介紹
人補體片斷3b(C3b)elisa試劑盒操作步驟 英文名稱:Human Complement fragment 3b,C3b ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。
英文名稱:Human Complement fragment 3b,C3b ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
人補體片斷3b(C3b)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
人補體片斷3b(C3b)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或 者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人補體片斷3b(C3b)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人補體片斷3b(C3b)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
Mouse Anti-Guinea pig IgG/Bio 生物素標記的小鼠抗豚鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
Acetyl and phospho-Histone H3(Ac-K9/p-Ser10) 乙酰化和磷酸化組蛋白H3抗體規(guī)格: 0.1ml
FAM59A FAM59A蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-TLK1(Ser695) 磷酸化調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體規(guī)格: 0.1ml
CCR9 細胞表面趨化因子受體9抗體規(guī)格: 0.1ml
Dog IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗犬IgM抗體規(guī)格: 0.1ml
Phospho-DBC1 (Thr454) 磷酸化膀胱缺失基因1抗體規(guī)格: 0.1ml
Neutrophil Elastase/ELANE 中性粒細胞彈性蛋白酶ELANE抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-RPS6KB1(Ser421) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-APP/ABPP(Tyr757) 磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
Twist2 TWIST蛋白2抗體抗體規(guī)格: 0.2ml
Bile salt-activated lipase 膽鹽激活脂肪酶抗體規(guī)格: 0.2ml
ADNP/NAP 活性依賴的神經(jīng)保護肽抗體規(guī)格: 0.1ml
Insulin Receptor/CD220 胰島素受體抗體規(guī)格: 0.1ml
Acinus Acinus抗體 0.2ml
Phospho-NFKB1(Ser907) 磷酸化細胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體規(guī)格: 0.1ml
NPAP1 核孔蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-dog IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗狗IgG規(guī)格: 0.1ml
OS9 OS-9蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Donkey Anti-human IgG/Cy3 Cy3標記的驢抗人IgG規(guī)格: 0.1ml
HRG Beta1 Heregulin β蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
FAM82A1 微管動力調(diào)節(jié)蛋白FAM82A抗體規(guī)格: 0.2ml
TSHR (NT) 促甲狀素受體抗體(N端)規(guī)格: 0.1ml肌肉組織來源細胞英文名稱:HMF
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
褐單梗曲霉 Ochrobactrum anthropi
球菌屬 Lactococcus sp.
苜蓿中華根瘤菌
SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢腺細胞系
無花果曲霉 Aspergillus ficuum
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
田菁根瘤菌 Azorhizobium canlinodans
Ana-1(小鼠巨噬細胞)5×106cells/瓶×2
雅致放射毛霉 Actinomucor elegans
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
Plant Protein Extraction Kit/植物蛋白提取試劑盒25次、100次國產(chǎn)gersion
膠紅酵母 Rhodotorula mucilaginosa
黑木耳 Auricularia auricula
中分子量單一蛋白Marker(90 kD)50次國產(chǎn)
小鼠小腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
木糖葡萄球菌 Staphylococcus xylosus
費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
myc Tag IP/Co-IP Kitmyc標簽免疫沉淀試劑盒25次試劑盒gersion
沙氏桿菌 Lactobacillus sharpeae
草菇 Volvariella bombycina
小鼠膀胱上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
人補體片斷3b(C3b)elisa試劑盒操作步驟大鼠腎足突細胞*培養(yǎng)基100mL
土曲霉 Aspergillus terreus
淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus
Lec1(倉鼠卵巢細胞)5×106cells/瓶×2
嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus