人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)elisa試劑盒實驗方法     英文名稱：Human Factor Ⅷ-related Antigen,FⅧAg ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱：uman Factor Ⅷ-related Antigen,FⅧAg ELISA Kit  
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測定試劑盒用途：科研與實驗試劑，不得用于臨床診斷。
標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)elisa試劑盒實驗方法樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或 者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)elisa試劑盒實驗方法操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個濃度）、空白孔、待測樣品組。 注：為減少實驗誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項：
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間，從而影響 實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個標(biāo)本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商， 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)elisa試劑盒實驗方法安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

CD68  CD68抗體規(guī)格: 0.1ml

CD86/B7-2  CD86抗體規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgG/PE  PE標(biāo)記的兔抗雞IgG規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗雞IgM規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-dog IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的兔抗狗IgG規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-human IgG/PE  PE標(biāo)記的兔抗人IgG規(guī)格: 0.1ml

pan 14-3-3  14-3-3蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

B7-DC/CD273/PDL2  程序性死亡配體2抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-Bad(Ser136)  磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體規(guī)格: 0.1ml

PSME3/PA28 gamma  蛋白酶體激活因子PA28γ抗體規(guī)格: 0.2ml

BRCC4/BRCC45  易感基因復(fù)合蛋白4抗體規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-rat IgG/APC  APC標(biāo)記的羊抗大鼠IgG規(guī)格: 0.1ml

Goat Anti-Guinea pig IgG/Cy5  Cy5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG規(guī)格: 0.1ml

Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的羊抗兔IgG規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgM/Cy7  Cy7標(biāo)記的小鼠抗人IgM規(guī)格: 0.1ml

Annexin A10/14  膜粘連蛋白10抗體規(guī)格: 0.1ml

Arhgef2/GEF H1  Rho鳥苷酸交換因子2抗體規(guī)格: 0.2ml

ESYT1/FAM62A  延伸突觸蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

Ninjurin 2  神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml

ASIC1/BNaC2  酸敏感離子通道1抗體規(guī)格: 0.1ml ABT-199 （1 mg）GDC 0199； 4-

Tenovin-3 （10 mg）N-

Ponasterone A （1 mg）25-Deoxyecdysterone； （5β）-2β,3β,14,20,22R-pentahydroxy-cholest-7-en-6-one

Danazol （250 mg）Danocrine|Ladogal|NSC 270916|WIN 17,757； pregna-2,4-dien-20-yno[2,3-d]isoxazol-17α-ol

cis,cis-Octadeca-9,12-dienol （500 mg）Linoleic alcohol|Linoleyl alcohol； 9Z,

SotrastaurinAEB071； 3-

BRL 50481 （10 mg）N,N,2-trimethyl-5-nitro-benzenesulfonamide

Naltrindole （hydrochloride） （5 mg）（4bS,8R,8aS,14bR）-7-（cyclopropylmethyl）-5,6,7,8,14,14b-hexahydro-4,8-methanobenzofuro[2,3-a]pyrido[4,3-b]carbazole-1,8a（9H）-diol, monohydrochloride

5-Aminolevulinic Acid （hydrochloride） （500 mg）5-ALA|δ-Aminolevulinic Acid； 5-amino-4-oxo-pentanoic acid, monohydrochloride

AKB48 RM （5 mg）APINACA； 1-pentyl-N-tricyclo[3.3.1.13,7]dec-1-yl-1H-indazole-3-carboxamide

Peptide YY （3-36） （100 ug）Pancreatic Peptide YY|Peptide Tyrosine Tyrosine

*基化組蛋白H3K36多肽Trimethyl Histone H3K36 Peptide （100 ul）

Z-FA-FMKFMK Negative Control

CCI-779，ToriselTemsirolimus （CCI-779， Torisel）

（[2S，3R]-3-Amino-2-hydroxy-4-phenylbutanoyl）-L-leucine； UbenimexBestatin

人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)elisa試劑盒實驗方法Q-Val-Glu-OPh； Quinolyl-Val-Glu-OPhEZSolution Q-VD-OPh， Negative Control

（2Z）-5-（4-Chlorophenyl）-3-phenyl-2-pentenoic acidPS48

（E）-4-（（4-）1H-1，2，3-Triazol-1-yl）butyl）phenoxy）methyl）-2-（4-trifluoromethyl）oxazole； MubritinibTAK 165

（S）-4-ethyl-4-hydroxy-1H-pyrano[3’，4’:6，7]indolizi，2-b]quinoline-3，14-（4H，12H）-dioneCamptothecin

N-p-Tosyl-L-arginine methyl ester hydrochlorideTAME Hydrochloride