詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:類胡蘿卜素(carotenoid)分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測(cè)試方法: 分光光度法
貨號(hào):GOY-01S6990
分類:光合作用系列
商品介紹:
類胡蘿卜素是一種脂溶性且具有營養(yǎng)特性的化合物,給植物和動(dòng)物提供天然色素,是重要的抗氧化劑,并有能力轉(zhuǎn)換為必需維生素。類胡蘿卜素可預(yù)防細(xì)胞,組織和基因損毀,增強(qiáng)身體免疫系統(tǒng),抵御感染,減少癌癥風(fēng)險(xiǎn),保護(hù)心臟。
測(cè)定原理
樣品通過混合有機(jī)溶劑萃取,類胡蘿卜素與非類胡蘿卜素成分分離,在440nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、烘箱,100目篩、三角瓶或燒杯、漏斗,紗布、玻璃試管、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣1抗體 腫瘤錯(cuò)配修復(fù)基因PMS1抗體
孤獨(dú)癥易感基因2蛋白抗體(自閉癥相關(guān)蛋白1) 腫瘤標(biāo)志物CYFRA21-1抗體
脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)2型蛋白抗體 腫瘤/抗原家族4亞型7抗體
芳香基硫酸酯酶H抗體 腫瘤/抗原81抗體
淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體 腫瘤/抗原77抗體
大鼠蛋白激酶C epsilon(PKCε)elisa分析檢測(cè)試劑盒
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類胡蘿卜素(carotenoid)分光光度法測(cè)試盒4mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)1個(gè) 綠如藍(lán)核酸染料 (UV)0.5mL
4mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)1個(gè) 綠如藍(lán)蛋白染液250 次
4mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個(gè) 綠如蘭核酸染料 ( 可見光型 )10mL
4mL DNA 離心超濾管 (150-250 KD)1個(gè) 卵巢上皮細(xì)胞生長因子5mL
4mL DNA 離心超濾管 (300-500 KD)1個(gè) 卵白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,2mg/mL1mL
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