詳細介紹
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:土壤幾丁質(zhì)酶可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/24樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號:GOY-01S6862
分類:土壤系列
商品介紹:
幾丁質(zhì)主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨),以及真菌類的細胞壁中,而幾丁質(zhì)酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質(zhì)水解,具有抵御真菌侵染的作用,成為抗真菌病害的研究熱點。
測定原理
幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖,進一步與對二甲氨基產(chǎn)生紅色化合物,在585nm處有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性。
自備實驗用品及儀器
天平、水浴鍋、離心機、震蕩儀、可見分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板,甲苯、蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
一步法質(zhì)粒 DNAout 2.050 次 微量蛋白沉淀試劑盒50 次
一步法質(zhì)粒 DNAout 2.0100 次 微量單鏈 DNA 定量試劑盒1mL
一步法無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout50 次 微量 RNA 助沉劑0.1mL
一步法大提質(zhì)粒 DNAout5次 微量 RNA 定量試劑盒1mL
一步法 96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 離心法 )1次 微量 DNA 助沉劑0.1mL
土壤腐殖酸清除劑100mL 預(yù)混型丙 - 甲叉雙丙烯干粉 (29:1)100g
一步離心式石蠟清除劑100 次 預(yù)混型丙 - 甲叉雙丙烯干粉 (19:1)100g
菌體內(nèi)毒素清除劑200mL 魚類種屬鑒定 PCR Mix100 次
紅細胞裂解液 A 型 ( 核酸純化 ) 100mL 熒光尺1個
紅細胞裂解液 B 型 ( 流式細胞分析用 ) 100mL 銀染清除劑30 次
β-半乳糖苷酶(β-GAL)測試盒
β-AMS測試盒 50管/24樣 比色法
β-測試盒
β-胡蘿卜素含量的測試
β-木糖苷酶測定試劑盒
土壤幾丁質(zhì)酶可見分光光度法測試盒m7G(5′)ppp(5′)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD 電泳級 SYBR Green I50μL
G(5′)ppp(5′)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD 電泳級 MOPS100g
G(5′)ppp(5′)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD 第五章 核酸擴增產(chǎn)品
3′-O-Me-m7G(5′)ppp(5′)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD 第四章 探針標記及檢測產(chǎn)品
NTP 溶液,10mM0.5mL 第三章 “歸去來"核酸電泳及回收產(chǎn)品
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。