詳細(xì)介紹
商品介紹:
土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,是評價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍,分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。
測定原理:
堿性環(huán)境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉,通過測定酚的生成量即可計(jì)算出S-AKP/ALP活性。
自備儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水、無水乙醇和甲苯。
產(chǎn)品名稱:土壤堿性磷酸酶(SAKP/ALP)可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號:GOY-01S6835
分類:土壤系列
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
細(xì)胞骨架銜接蛋白BIN3抗體 尤文肉瘤FLI1蛋白抗體
Bcr抗體 應(yīng)激誘導(dǎo)0蛋白1抗體
0酸化乳腺癌易感基因1抗體(人) 應(yīng)激誘導(dǎo)分泌蛋白1抗體
0酸化T淋巴細(xì)胞受體抗體 熒光素酶抗體
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大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)elisa檢測試劑盒
大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)elisa分析檢測試劑盒
大鼠骨成型蛋白7(BMP7)elisa檢測試劑盒
大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)elisa檢測試劑盒
大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)elisa分析檢測試劑盒
土壤堿性磷酸酶(SAKP/ALP)可見分光光度法測試盒RIPA 裂解液 ( 弱 )100mL Sodium orthovanadate( 0酸酯酶抑制劑 )2g
NP-40 裂解液100mL Sodium Butyrate(HDAC 抑制劑 )1g
動(dòng)植物總蛋白微量提取試劑盒50 次 SOD( 抗氧化酶 )65KU
動(dòng)植物膜蛋白微量制備試劑盒50 次 SNP(NO 供體 )1g
動(dòng)物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒25 次 SMT(iNOS 抑制劑 )100mg