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產(chǎn)品名稱:土壤過氧化氫酶(SCAT)紫外分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/24樣
測試方法: 紫外分光光度法
貨號:GOY-01S6824
分類:土壤系列
商品介紹:
S-CAT是土壤微生物代謝的重要酶類,在H2O2清除系統(tǒng)中具有重要作用。
測定原理:
H2O2在240nm下有特征吸收峰,通過測定與土壤反應(yīng)后溶液在此波長下吸光度的變化,即可反應(yīng)S-CAT活性的高低。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (100-1500 bp)50 次 G 鉀鹽溶液 ,200mg/mL1 Mu
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (100-5000 bp)50 次 親和硅烷 25mL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (300-10000 bp)50 次 親和層析柱6 mL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (2)(50-400 bp)50 次 親和層析柱50 mL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (2)(300-5000 bp)50 次 親和層析柱30 mL
人白細(xì)胞分離液 1.078200mL 0.5mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個(gè)
人中性粒細(xì)胞分離液 1.085200mL 0.5mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)1個(gè)
人粒細(xì)胞分離液 1.113200mL 0.5mL DNA 離心超濾管 (150-250 KD)1個(gè)
小鼠腫瘤細(xì)胞分離液 1.070200mL
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.071200mL
倉鼠白介素1β(IL-1β)elisa檢測試劑盒
倉鼠白介素2(IL-2)elisa分析檢測試劑盒
倉鼠白介素2(IL-2)elisa檢測試劑盒
倉鼠白介素3(IL-3)elisa分析檢測試劑盒
倉鼠白介素3(IL-3)elisa檢測試劑盒
土壤過氧化氫酶(SCAT)紫外分光光度法測試盒RNase 抑制劑 ( 人源 )400U 柱式 miRNA PAGE 膠回收試劑盒50 次
RNase 抑制劑 ( 人源 )2500U 柱式 G+細(xì)菌 RNAout50 次
RNase 抑制劑 ( 小鼠源 )3000U 柱式 DNA 清除劑50 次
RNase 抑制劑 ( 豬源 )500U 柱式 DNA 膠回收試劑盒50 次
非酶 DNA 清除劑1.5mL 柱式 DNA 膠回收試劑盒100 次
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。