詳細(xì)介紹
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱(chēng):氨基比林N去甲基化酶(AND)可見(jiàn)分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格 : 50管/24樣
測(cè)試方法: 可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào):GOY-01S6779
分類(lèi):P454系列
商品介紹:
細(xì)胞色素P450酶是一組在外源物質(zhì)代謝中,尤其是藥物和毒物,具有重要作用的酶系。AND作為P450酶系的重要一員,相當(dāng)于CYP3A4亞型,與藥物的去甲基化反應(yīng)密切相關(guān)。
測(cè)定原理:
AND催化氨基比林釋放甲醛,通過(guò)Nash比色法測(cè)定甲醛含量,即可計(jì)算出AND活性。
自備儀器和用品:
普通離心機(jī),超速離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水、無(wú)水乙醇和冰。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱(chēng)取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
Fluorescein-12-dUTP 溶液,1mM25μL 酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒20 次
Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL 酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒 ( 含轉(zhuǎn)化液 )20 次
Cy5-dCTP 溶液,10mM25μL 酵母電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒20 次
柱式探針純化試劑盒10 次 酵母蛋白酶抑制劑1mL
Sephadex G50 介質(zhì)10mL 酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL
間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨細(xì)胞分化生長(zhǎng)因子5mL EGY48 酵母感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白級(jí)10mL
間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)因子 - 無(wú)血淸5mL EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白級(jí)10mL
間充質(zhì)干細(xì)胞脂防細(xì)胞分化生長(zhǎng)因子5mL EcoR I-Not I-BamH I 接頭1nmol
角膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL ECL 法雜交檢測(cè)試劑盒5次
大鼠1,25二羥基D3(1,25 DHVD3)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠1,25二羥基D3(1,25 DHVD3)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠1,25二羥基D3(1,25(OH)2D3/DVD/DHVD3)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠1,25-二羥基D3(DHVD3)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠1,25-二羥D(3)24-羥化酶,線(xiàn)粒體(CYP24A1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
氨基比林N去甲基化酶(AND)可見(jiàn)分光光度法測(cè)試盒暗盒 (5×7 英寸 )1個(gè) 素溶液 ,100mg/mL10mL
暗盒 (8×10 英寸 )1個(gè) 黑色素細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
DNA 包被溶液100mL 黑色素細(xì)胞生長(zhǎng)因子 - 不含 TPA5mL
X 光片 (5×7 英寸 )1盒 核酸印跡膜染液100mL
X 光片 (8×10 英寸 )1盒 核酸稀釋液,測(cè) OD 專(zhuān)用100mL
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。