詳細介紹
商品介紹:
α-L-Af 是一種能夠水解非還原呋喃阿拉伯糖殘基的糖苷酶類,使細胞壁阿拉伯半乳聚糖、阿拉伯甘露聚糖等中性糖不斷解離,促進果膠的增溶和降解。由于果實成熟過程中常常伴隨著阿拉伯糖的喪失,該酶活性在果實成熟軟化中的研究具有重大意義。
測定原理:
α-L-Af分解對硝基酚阿拉伯呋喃糖苷生成對-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算α-L-Af活性。
自備用品:
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 測試方法 | 貨號 |
αL阿拉伯呋喃糖苷酶(αLAf)微量法測試盒 | 100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6770 |
劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
測定操作表:
酶活性計算公式:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按樣本質量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按細胞數(shù)量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數(shù)量)÷T= 18×A460÷細胞數(shù)量
(4) 按液體體積計算
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε:氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù):7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應中樣本體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;T:反應時間,30min
b. 用96孔板測定的計算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按樣本質量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按細胞數(shù)量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
22號染色體開放閱讀框45抗體 神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調節(jié)蛋白3抗體
22號染色體開放閱讀框32抗體 神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調節(jié)蛋白2抗體
補體C3a過敏毒素抗體 神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調節(jié)蛋白1抗體
巨噬細胞炎癥蛋白-1γ抗體 神經(jīng)元特異性烯醇化酶/γ 烯醇化酶抗體
8號染色體開放閱讀框30a抗體 神經(jīng)元特異性蛋白家族成員2抗體
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