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          蔗糖磷酸合成酶(SPS)可見分光光度法測(cè)試盒

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          • 蔗糖磷酸合成酶(SPS)可見分光光度法測(cè)試盒

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2022-03-14 16:57:00瀏覽次數(shù):368

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/24樣
          貨號(hào) GOY-01S6701 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅用于科研    
          蔗糖磷酸合成酶(SPS)可見分光光度法測(cè)試盒公司各類熱銷產(chǎn)品大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)elisa分析檢測(cè)試劑盒
          豬偽狂犬病毒(PRV)抗體(IgG)elisa檢測(cè)試劑盒
          豬D(VD)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
          豬褪黑素(MT)elisa檢測(cè)試劑盒
          豬透明質(zhì)酸(HA)elisa檢測(cè)試劑盒

          詳細(xì)介紹

          商品介紹:
          蔗糖不僅是重要的光合產(chǎn)物,也是植物體內(nèi)運(yùn)輸?shù)闹饕镔|(zhì),還是碳水化合物的貯存形式之一。SPSEC 2.4.1.14)以果糖-6-磷酸為受體,形成的蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系統(tǒng)看作是蔗糖合成的主要途徑。

          測(cè)定原理

          蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸,蔗糖磷酸與間苯二酚反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化,在480nm下有特征吸收峰,酶活力大小與顏色的深淺成正比。

          需自備的的儀器和用品

          可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、離心機(jī)、移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰

          產(chǎn)品名稱:蔗糖磷酸合成酶(SPS)可見分光光度法測(cè)試盒
          規(guī)格50/24
          測(cè)試方法可見分光光度法
          貨號(hào):GOY-01S6701
          分類:蔗糖系列

          試劑的組成和配制
          提取液一:液體50mL×1瓶,4保存。
          提取液二:液體50mL×1瓶,4保存。
          試劑一:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
          試劑二:液體18μL×1瓶,4保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
          試劑三:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
          試劑四:液體50mL×1瓶, 4保存;
          測(cè)定步驟
          1
          、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
          2
          、 將試劑一、二、三37(哺乳動(dòng)物)25(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
          3
          、 加樣表:

          圖2.jpg

          樣本的前處理
          FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4,8000g離心10min,取上清測(cè)定。
          胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)1510的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4,200g離心5min,棄沉淀,取上清在48000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
          建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟提取粗酶液。
          FBP活性計(jì)算:
          1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
          單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
          FBP
          nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
          2)按樣本鮮重計(jì)算
          單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
          FBP
          nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
          V
          反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;εNADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mLT:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
          【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明!
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