詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:半胱氨酸(Cys)可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號:GOY-01S6530
分類:氨基酸代謝系列
商品介紹:
蛋白質(zhì)含有三種含硫氨基酸:甲硫氨酸、胱氨酸和Cys。其中,Cys是一種含有巰基的含硫氨基酸,從甲硫氨酸轉(zhuǎn)化而來,并且可與胱氨酸互相轉(zhuǎn)化。Cys參與蛋白質(zhì)二硫鍵的形成,經(jīng)常是蛋白質(zhì)活性中心的組成部分,還可以為其它生理生化反應(yīng)提供巰基。此外,Cys大量積聚在皮膚和粘膜表面,在角蛋白生成中維持重要的琉基酶的活性,并且補(bǔ)充硫基,以維持皮膚的正常代謝,調(diào)節(jié)表皮最下層的色素細(xì)胞生成的底層黑色素。具有美白、解毒、改善炎癥和過敏性皮膚等作用。
測定原理
半胱氨酸與磷鎢酸反應(yīng),可將磷鎢酸還原成鎢藍(lán),在600nm處有吸收峰,通過測定鎢藍(lán)的生成量,即可計算出半胱氨酸含量。
實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備
可見分光光度計、低溫離心機(jī)、掌上離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
常用PCR引物100uL 大鼠 NK 細(xì)胞分離液 1.068200mL
第六章 “克必隆"克隆及表達(dá)產(chǎn)品 大片段 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)50μg
加 A 試劑盒50 次 磁珠植物 DNAout50 次
加 T 試劑盒50 次 磁珠血液 DNAout50 次
DNA 粘轉(zhuǎn)平試劑盒20 次 磁珠法 mRNA 提取試劑盒25 次
磁珠法 mRNA 提取試劑盒25 次 柱式動物 RNAout50 次
Oligo(dT) 纖維素25mg 柱式動物 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次
Oligo(dT) 再生溶液100mL 柱式動物 DNAout50 次
鏈霉親和素磁珠2mL 柱式凋亡 DNAout50 次
固相 RNase 清除劑100mL 柱式病毒 RNAout50 次
大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa分析檢測試劑盒
大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa檢測試劑盒
大鼠B-細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl2)elisa檢測試劑盒
大鼠B因子(BF)elisa分析檢測試劑盒
大鼠B因子(BF)elisa檢測試劑盒
半胱氨酸(Cys)可見分光光度法測試盒骨骼肌細(xì)胞生長因子5mL Fluo-3AM( 鈣離子熒光探針 )250μL
黑色素細(xì)胞生長因子5mL Fluo-3,五銨鹽1mg
黑色素細(xì)胞生長因子 - 不含 TPA5mL Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )100μL
滑膜細(xì)胞生長因子5mL ER-Tracker Red( 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針 )20μL
間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞分化生長因子5mL EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!