詳細(xì)介紹
商品介紹:
LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮氨酸的酶,廣泛存在于肝、腎、胰等組織中,尤其以肝臟中含量最為豐富。各類肝病患者因肝細(xì)胞損傷,血清LAP的活性均有不同程度的升高,因此,血清LAP活性的檢測(cè)能從不同側(cè)面反映各種肝病的發(fā)生和發(fā)展。
測(cè)定原理:
LAP分解L-亮氨酰對(duì)硝基苯胺生成對(duì)硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算LAP活性。
自備用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
產(chǎn)品名稱:亮氨酸氨基肽酶(LAP)微量法測(cè)試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測(cè)試方法: 微量法
貨號(hào):GOY-01S6511
分類:氨基酸代謝系列
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明!
XL1-Blue 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10 百萬(wàn)堿基級(jí)細(xì)菌 (G+)DNAout10 次
BL21(DE3) 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10 百萬(wàn)堿基級(jí)細(xì)菌 (G-)DNAout10 次
BL21(DE3)pLysS 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10 百萬(wàn)堿基級(jí)動(dòng)物 DNAout10 次
Origami(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10 白細(xì)胞裂解液100mL
Origami B(DE3)plysS 感受態(tài)細(xì)胞 0.1mL×10 暗盒 (8×10 英寸 )1個(gè)
氨芐溶液 ,50mg/mL10mL TMB 法雜交試劑盒5次
氨芐干粉1g TLR4 激活劑2mL
溶液 ,100mg/mL1mL TG1 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
溶液 ,10mg/mL1mL TdT 加尾法 DNA 標(biāo)記試劑盒5次
溶液 ,50mg/mL1mL TdT 加尾法 DNA 標(biāo)記試劑盒5次
大鼠CD83分子(CD83)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠CD8分子(CD8)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠CD8分子(CD8)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠CDCP1 elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠CDCP1 elisa檢測(cè)試劑盒
亮氨酸氨基肽酶(LAP)微量法測(cè)試盒角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL E-64 蛋白酶抑制劑,20mg/mL10mL
角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子 - 不含 BPE5mL dUTP 溶液,100mM 0.4mL
角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子 - 不含動(dòng)物成分5mL dTTP 溶液,2.5mM2mL
口腔角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL dTTP 溶液,100mM0.5mL
卵巢上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL DTT,免稱量蛋白級(jí)48 管