詳細介紹
劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 測試方法 | 貨號 |
谷氨酰胺合成酶(GS)微量法測試盒 | 100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6493 |
商品介紹:
GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不僅可以防止過多的銨離子對生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要儲存和運輸形式。
測定原理
GS在ATP和Mg2+存在下,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺進一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨?;惲u肟酸,在酸性條件下與鐵形成紅色的絡合物;該絡合物在540nm處有最大吸收峰,可用分光光度計測定。
所需的儀器和用品
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
測定操作表:
酶活性計算公式:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按細胞數(shù)量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數(shù)量)÷T= 18×A460÷細胞數(shù)量
(4) 按液體體積計算
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε:氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù):7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應中樣本體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應時間,30min
b. 用96孔板測定的計算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按細胞數(shù)量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
溶液 ,100mg/mL1mL TCEP 鹽酸膦1g
溶液 ,100mg/mL1mL TCEP 溶液,0.5M5mL
干粉1g TBE 電泳液 ,10×250mL
溶液 ,25mg/mL10mL TBE 電泳液 ,10×2500mL
A 溶液 ,10mg/mL1mL TB1 感受態(tài)細胞10×100μL
Southern 級細菌 (G-)DNAout10 次 小鼠內(nèi)皮細胞分離液 1.071200mL
Southern 級細菌 (G+)DNAout10 次 小鼠抗 His 標簽單抗100μL
一步式細菌 DNAout50 次 小鼠抗 His 標簽單抗1000μL
分枝桿菌 DNAout50 次 小鼠抗 Flag 標簽單抗100μL
柱式分枝桿菌 DNAout50 次 小牛胸腺 DNA 溶液1mL
大鼠E1A結(jié)合蛋白P300(EP300)elisa檢測試劑盒
大鼠E3-RSIκB elisa分析檢測試劑盒
大鼠E3-RSIκB elisa檢測試劑盒
大鼠elisa分析檢測試劑盒
大鼠elisa檢測試劑盒
谷氨酰胺合成酶(GS)微量法測試盒硫酸葡聚糖1g 即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒300 次
聚乙二醇100g 即用型熒光定量 PCR 試劑盒600 次
酪蛋白50g 即用型熒光定量 PCR 試劑盒100 次
脫脂奶粉 ( 雜交專用 )50g 即用型易錯 PCR 試劑盒100 次
即用型封堵液 (NC 專用 ) 50mL 即用型熱啟動 PCR 試劑盒1.5mL
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