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產(chǎn)品名稱:花青素還原酶(ANR)可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號:GOY-01S6468
分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
花青素還原酶是黃酮合成途徑中的關(guān)鍵酶,在植物體內(nèi)起非常重要的調(diào)控作用,對花青素還原酶的調(diào)控機(jī)制研究有利于從基因水平改變植物的品質(zhì)。
測定原理:
花青素還原酶在NADPH存在的條件下作用于飛燕草色素轉(zhuǎn)變?yōu)楸頉]食子兒茶素和NADP,使反應(yīng)體系在340nm處的吸光值下降,吸光值下降速率反應(yīng)了花青素還原酶的活性。
需自備的儀器和用品:
天平、研缽、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
細(xì)菌膜蛋白質(zhì)微量提取試劑盒50 次 Rosetta-gami(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
0酸化蛋白純化試劑盒50 次 Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
糖蛋白蛋白純化試劑盒50 次 Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
脂蛋白純化試劑盒50 次 Rosetta 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
細(xì)胞表面蛋白分離試劑盒8次 RNase-free 異硫酸胍溶液 ,5M100mL
RNA 級 SDS( 十二烷基硫酸 )100g 真菌種屬鑒定 PCR Mix 4100 次
RNA 級 Tris Base( 三羥甲基氨基 )100g 真菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次
剪切式勻漿機(jī)1臺 真菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次
1μL 超微量分光光度計1個 真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次
帶柄尼龍篩1個 真菌 RNAout50 次
大鼠L-乳酸脫氫酶(L-LDH) elisa分析檢測試劑盒
大鼠L-乳酸脫氫酶(L-LDH) elisa檢測試劑盒
大鼠L-乳酸脫氫酶(L-LDH)elisa檢測試劑盒
大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)elisa分析檢測試劑盒
大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)elisa檢測試劑盒
花青素還原酶(ANR)可見分光光度法測試盒軟骨 RNAout50 次 柱式真菌 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次
柱式軟骨 RNAout50 次 柱式真菌 DNAout50 次
石蠟包埋組織 RNAout30 次 柱式藻類 RNAout50 次
免 RNA 提取 FFPE RT-PCR 試劑盒30 次 柱式血液 RNAout50 次
柱式昆蟲 RNAout50 次 柱式血液 mtDNAout,測序級10 次
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。