詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:羥自由基清除能力可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號:GOY-01S6443
分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物分子,造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損,進而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一,在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。
測定原理:
H2O2/ Fe2+ 通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基,水楊酸能有效捕捉產(chǎn)生的羥自由基并與其反應(yīng)生成有色物質(zhì)2,3-二羥基苯甲酸,在510nm處有最大吸收峰,加入具有清除能力的物質(zhì)后,有色物質(zhì)便會減少,從而可以根據(jù)吸光值的數(shù)值判斷樣品清除羥自由基的能力。
自備實驗用品:
恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96孔板和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
鈣調(diào)蛋白結(jié)合轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 ?;?/span>A脫氫酶長鏈抗體
細(xì)胞粘附分子4抗體 酰基A脫氫酶很長鏈抗體
腫瘤抑制因子FBW7抗體 ?;?/span>A脫氫酶短鏈抗體
周期素依賴性激酶5激活結(jié)合蛋白C53抗體 ?;?/span>A硫酯酶8
著絲粒蛋白H抗體 ?;?/span>A結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體
大鼠亮氨酸豐富α2-糖蛋白1(LRG1)elisa檢測試劑盒
大鼠亮氨酰氨基肽酶(LAP)elisa檢測試劑盒
大鼠淋巴毒素β(LTβ)elisa檢測試劑盒
大鼠淋巴細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原1α(LFA1α)elisa檢測試劑盒
大鼠淋巴細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原2(LFA2)elisa檢測試劑盒
羥自由基清除能力可見分光光度法測試盒填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C5次 接頭 DNA(Sal I-Sma I)5nmol
DNA 5’末端標(biāo)記試劑盒10 次 接頭 DNA(pSma I)5nmol
dNTP 溶液 ( 標(biāo)記專用 )0.5mL 接頭 DNA(Hind Ⅲ -Sma I)5nmol
標(biāo)記 dUTP 溶液50μL 接頭 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol
Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μL 接頭 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!