詳細介紹
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:脂質(zhì)過氧化物(LPO)微量法測試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測試方法: 微量法
貨號:GOY-01S6412
分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
脂質(zhì)過氧化是動植物體內(nèi)活性氧(ROS)氧化生物膜的過程,脂質(zhì)過氧化物(LPO)是脂質(zhì)過氧化過程的產(chǎn)物,即ROS與生物膜的磷脂、酶和膜受體相關(guān)的多不飽和脂肪酸的側(cè)鏈及核酸等大分子物質(zhì)起脂質(zhì)過氧化反應(yīng)形成LPO,使細胞膜的流動性和通透性發(fā)生改變,最終導(dǎo)致細胞結(jié)構(gòu)和功能的改變。因此,LPO常被作為機體氧化應(yīng)激的一種指標(biāo),與某些疾病的病理過程,如腫瘤、化學(xué)中毒、感染、炎 癥、自身免疫疾病、動脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,以及衰老等生理過程密切相關(guān)。
測定原理:
LPO在酸性條件下加熱,產(chǎn)生小分子終產(chǎn)物MDA,MDA(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在535nm有最大吸收峰。
需自備的儀器和用品:
分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 中 pH)30 次 IPTG 干粉2.5g
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH)30 次 Ionomycin( 鈣離子載體 )250nmol
高 pH 緩沖液套裝30 次 Insulin18mg
中 pH 緩沖液套裝30 次 Indo-1,五銨鹽1mg
低 pH 緩沖液套裝30 次 Indo-1 AM1mg
Fura-2 AM( 鈣離子熒光探針 )1mg DNA PAGE 膠回收試劑盒30 次
Fura-2,五銨鹽1mg DNA PAGE 膠回收試劑盒100 次
Golgi-Tracker Red( 高爾基體紅色熒光探針 )1mg DNA 5’末端標(biāo)記試劑盒10 次
Hydroxystilbamidine 10mg DMSO,PCR 級1.5mL
Indo-1 AM1mg dITP 溶液,2.5mM2mL
大鼠V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)elisa檢測試劑盒
大鼠WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)elisa檢測試劑盒
大鼠Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)elisa檢測試劑盒
大鼠YY肽(PYY)elisa檢測試劑盒
大鼠α1-抗(α1AT)elisa檢測試劑盒
脂質(zhì)過氧化物(LPO)微量法測試盒血液 DNAout150 次 一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 高 pH)30 次
柱式血液 DNAout50 次 一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH)30 次
柱式血液 DNAout200 次 一站式大提柱式 miRNAout5次
磁珠血液 DNAout50 次 一站式磁珠法植物 mRNAout50 次
柱式血液 DNA-RNAout50 次 一站式磁珠法真菌 mRNA 提取試劑盒50 次
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。