詳細(xì)介紹
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:過氧化氫酶(CAT)(紫外吸收法)微量法測試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測試方法: 微量法
貨號:GOY-01S6403
分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是最主要的H2O2清除酶,在活性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用。
測定原理:
H2O2在240nm下有特征吸收峰,CAT能夠分解H2O2,使反應(yīng)溶液240nm下的吸光度隨反應(yīng)時間而下降,根據(jù)吸光度的變化率可計算出CAT活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
CD226抗體 腺樣癌特異性相關(guān)抗原EMC1抗體
CD26抗體 腺相關(guān)病毒5抗體
8型膠原/內(nèi)皮膠原蛋白抗體 腺相關(guān)病毒5 VP1抗體
結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體 腺嘌呤0酸核糖轉(zhuǎn)移酶抗體
P450 2C9抗體 腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體
大鼠抗血小板抗體IgA(PA-IgA)elisa分析檢測試劑盒
大鼠抗血小板抗體IgA(PA-IgA)elisa檢測試劑盒
大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)elisa檢測試劑盒
大鼠抗(AT)elisa分析檢測試劑盒
大鼠抗(AT)elisa檢測試劑盒
過氧化氫酶(CAT)(紫外吸收法)微量法測試盒一步式 RT-PCR Mix 1mL 動物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒100 次
免 RNA 提取 RT-PCR 試劑盒 100 次 動物上皮細(xì)胞生長因子5mL
即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒50 次 動物 RNAout(TRIzol) 250mL
即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒300 次 動物 RNAout(TRIzol) 100mL
通用型全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次 動物 DNAout250mL
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。