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產(chǎn)品名稱:過氧化氫(H2O2)微量法測試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測試方法: 微量法
貨號(hào):GOY-01S6409
分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
H2O2是生物體內(nèi)最常見的活性氧分子,主要由SOD和XOD等催化產(chǎn)生,由CAT和POD等催化降解。H2O2不僅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互轉(zhuǎn)化的樞紐。一方面,H2O2可以直接或間接地氧化細(xì)胞內(nèi)核酸,蛋白質(zhì)等生物大分子,并使細(xì)胞膜遭受損害,從而加速細(xì)胞的衰老和解體;另一方面H2O2也是許多氧化應(yīng)急反應(yīng)中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。
測定原理:
H2O2與硫酸鈦生成黃色的過氧化鈦復(fù)合物,在415nm有特征吸收。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、丙酮60mL、濃鹽酸10mL、研缽和冰。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
乙醛脫氫酶1蛋白家族L1抗體 軸索過度生長抑制因子A+B抗體 Nogo-B/A
軸抑制蛋白2抗體 軸絲中鏈動(dòng)力蛋白抗體
AMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體 軸絲動(dòng)力蛋白重鏈9抗體
致瘤0蛋白32相關(guān)蛋白1抗體 軸絲動(dòng)力蛋白7抗體
極光激酶A相互作用蛋白1抗體 軸絲動(dòng)力蛋白10抗體
大鼠成纖維細(xì)胞生長因子受體1(FGFR1)elisa檢測試劑盒
大鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)elisa檢測試劑盒
大鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)elisa分析檢測試劑盒
大鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)elisa檢測試劑盒
大鼠穿孔素1(PRF1)elisa檢測試劑盒
過氧化氫(H2O2)微量法測試盒一步法 96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 真空法 )1次 脫脂奶粉 ( 雜交專用 )50g
一步法單菌落質(zhì)粒 DNAout50 次 脫氧膽酸5g
一步法96 孔板單菌落質(zhì)粒DNAout( 離心法)1次 兔抗 His 標(biāo)簽多抗,HRP 標(biāo)記100μL
一步法96 孔板單菌落質(zhì)粒DNAout( 離心法)5次 兔抗 GST 標(biāo)簽多抗20μL
一步法96 孔板單菌落質(zhì)粒DNAout( 真空法)1次 土壤腐殖酸清除劑100mL
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。