基質金屬蛋白酶3(MMP3)重組蛋白牛公司正在出售的產品：β羥丁酸(beta-Hydroxybutyric acid)ELISA試劑盒96T 0.156-10 umol/L人細胞死亡Bcl2拮抗劑(BAD)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL人短腭肺鼻腔上皮癌關聯(lián)蛋白2(SPLUNC2)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL

蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

 

 

產品名稱：基質金屬蛋白酶3(MMP3)重組蛋白牛

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)

SL1; STMY; STMY1; STR1; Progelatinase; Stromelysin 1; Transin-1

型號：GOY-01D62

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

心腦血管

物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌, 細胞外基質

預測分子量：56.3kDa

實際分子量：56kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Tyr18~Cys477 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：5.3

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

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操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

 

 

 

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

粘合連接相關蛋白1抗體 AJAP1

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奈正青霉 Eupenicillium sinaicum人支氣管平滑肌細胞培養(yǎng)基

RM1(大鼠肌肉成纖維樣細胞)小鼠卵巢顆粒細胞培養(yǎng)基

枝芽胞菌 Virgibacillus sp.桿菌屬 Lactobacillus sp.

費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium frediiIII型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)

USMC(大鼠血管平滑肌細胞)大鼠食管平滑肌細胞培養(yǎng)基

人心房肌細胞培養(yǎng)基凝結芽孢桿菌 Bacillus coagulans

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti香菇 Lentinula edodes

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarumM14(人黑色素瘤細胞)

人慢性骨髓性白血病細胞無色桿菌屬 Leucobacter sp.

佛羅里達側耳 Pleurotus florida異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala

田菁根瘤菌 Azorhizobium canlinodans293FT(人胚腎細胞)