蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)重組蛋白豚鼠

英文名稱：Recombinant Alanine Aminotransferase (ALT)

GPT; ALAT; SGPT; AAT1; GPT1; Serum Glutamic Pyruvic Transaminase; Alanine Transaminase; Glutamate pyruvate transaminase 1; Glutamic--alanine transaminase 1

型號(hào)：GOY-01D125

酶與激酶

感染免疫

肝膽病學(xué)

物種：Cavia (Guinea pig ，豚鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：-

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Lysyl Oxidase (LOX)  產(chǎn)品名稱：賴氨酰氧化酶(LOX)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Lysyl Oxidase (LOX)  產(chǎn)品名稱：賴氨酰氧化酶(LOX)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Vaccinia Related Kinase 1 (VRK1)  產(chǎn)品名稱：牛痘相關(guān)激酶1(VRK1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Xanthine Dehydrogenase (XDH)  產(chǎn)品名稱：脫氫酶(XDH)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant Xanthine Dehydrogenase (XDH)  產(chǎn)品名稱：脫氫酶(XDH)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Xanthine Dehydrogenase (XDH)  產(chǎn)品名稱：脫氫酶(XDH)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

腦特異性同源蛋白BSX抗體 BSX

ARF鳥苷酸交換因子BIG1抗體 BIG1

鋅指蛋白47抗體 BTB domain containing 5

?BTBD14A蛋白抗體 ?BTBD14A

鋅指蛋白851抗體 BTBD15

嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體 BTN2A1

磷酸化c-fos抗體 Phospho-c-Fos (Ser362)

磷酸化c-fos抗體 Phospho-c-Fos (Ser374)

磷酸化原癌基因c-kit抗體 Phospho-c-Kit (Tyr730)

1號(hào)染色體開放閱讀框148抗體 C1orf148

磷酸化原癌基因c-Jun抗體 phospho-c-Jun(Thr93)

細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗原-4抗體 CTLA4

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)重組蛋白豚鼠釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae大鼠前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

動(dòng)物雙歧桿菌 Bifidobacterium animalisFC33(人胚胎腎細(xì)胞(Asp-2基因修飾))

解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica少根根霉 Rhizopus arrhizus

玉蜀黍赤霉 Gibberella zeae香拴菌

小鼠卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

HCC827(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)CHO/中華倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞

瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

屎腸球菌 Enterococcus faeciumK7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞)

柱黃曲霉 Aspergillus flavus var. column成人表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基

大麗花輪枝孢泡盛曲霉 Aspergillus awamori

蠟狀芽胞桿菌 Bacillus cereus根瘤菌 Rhizobium sp.

PA317(小鼠成纖維細(xì)胞)人肝星形細(xì)胞

青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolescentis人子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基