產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D149 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh) |
物種 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) |
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15026555973 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2023-03-02 15:17:08瀏覽次數(shù):235
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D149 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh) |
物種 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
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英文名稱:Recombinant 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 14 (HSD17b14) 產(chǎn)品名稱:17-β-羥基類固醇脫氫酶14(HSD17b14)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白大鼠 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) | GOY-01D149 |
產(chǎn)品名稱:蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白大鼠
英文名稱:Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)
PRKCH; PRKC-H; PKC-L; PRKCL; NPKC-Eta
型號(hào):GOY-01D149
酶與激酶
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測(cè)分子量:-
實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體 CCDC28A
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白25抗體 CCDC25
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28B抗體 CCDC28B
腫瘤/睪抗原74抗體 CT74
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白38抗體 CCDC38
7號(hào)染色體開放閱讀框72抗體 C7orf72
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體 CCDC42
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體 CCDC47
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白46抗體 CCDC46
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白63抗體 CCDC63
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白43抗體 CCDC43
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白54抗體 CCDC54
蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白大鼠膠韌革菌宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
苜蓿中華根瘤菌凝結(jié)芽孢桿菌 Bacillus coagulans
膠凍樣芽胞桿菌 Bacillus mucilaginosus香菇 Lentinula edodes
HHCC(人肝細(xì)胞)MA-782(小鼠腺細(xì)胞)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
白靈側(cè)耳 Pleurotus nebrodensis
巴固氮螺菌 Azospirillum brasilense
大豆慢生根瘤菌植物桿菌 Lactobacillus plantarum
玫瑰小雙孢菌 Microbispora rosea金龜子綠僵菌 Metarhizium anisopliae
大鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)基人支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基
EC109,人食管細(xì)胞 Human
洛格酵母 Saccharomyces logos
費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii