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          核糖核酸酶A(RNase A)重組蛋白人

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          • 核糖核酸酶A(RNase A)重組蛋白人

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          更新時(shí)間:2023-03-02 15:47:32瀏覽次數(shù):213

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          貨號(hào) GOY-01D176 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Ribonuclease A (RNase A)
          物種 Homo sapiens (Human,人)    
          核糖核酸酶A(RNase A)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:人CX3C趨化因子/fractalkine(FKN/CX3CL1)ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒96T 31.2-2000 pg/mL人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒96T 31.2-2000 pg/mL

          詳細(xì)介紹

          以下是相關(guān)產(chǎn)品:

          英文名稱:Recombinant Galactosylceramidase (GALC)  產(chǎn)品名稱:半乳糖神經(jīng)酰胺酶(GALC)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

          英文名稱:Recombinant Arylsulfatase B (ARSB)  產(chǎn)品名稱:芳基酯酶B(ARSB)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

          英文名稱:Recombinant Glycine-N-Methyltransferase (GNMT)  產(chǎn)品名稱:-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(GNMT)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

          英文名稱:Recombinant Myo Inositol Oxygenase (MIOX)  產(chǎn)品名稱:肌醇加氧酶(MIOX)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

          英文名稱:Recombinant Trehalase (TREH)  產(chǎn)品名稱:海藻糖酶(TREH)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

          英文名稱:Recombinant Uracil DNA Glycosylase (UNG)  產(chǎn)品名稱:DNA糖基化酶(UNG)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          物種

          貨號(hào)

          核糖核酸酶A(RNase A)重組蛋白人

          Homo sapiens (Human,人)

          GOY-01D176

           

           

          產(chǎn)品名稱:核糖核酸酶A(RNase A)重組蛋白人

          英文名稱:Recombinant Ribonuclease A (RNase A)

          RNASE1; RNASE; Rnase-A; RNase UpI-1; RIB-1; Ribonuclease,RNase A Family,1(Pancreatic)

          型號(hào):GOY-01D176

          酶與激酶

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          來(lái)源:原核表達(dá)

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU per 1μg (determined by the LAL method).

          亞細(xì)胞定位::分泌

          預(yù)測(cè)分子量:16.1kDa

          實(shí)際分子量:18kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

          片段與標(biāo)簽:Lys29~Thr156 with N-terminal His Tag

          緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

          性狀:凍干粉

          純度:> 90%

          等電點(diǎn):8.8

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


          蛋白表達(dá)及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

          2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

          4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

          交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

          操作步驟:

          Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

           

          細(xì)胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個(gè)

          0.5 mL~1 mL

          5×106個(gè)

          0.2 mL~0.5 mL

           

           

          5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          公司正在出售的產(chǎn)品:

          電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體 CACNA1G

          L型鈣通道蛋白抗體 CACH2

          緊密連接蛋白3抗體 Claudin 3

          磷酸化原癌基因c-Jun抗體 phospho-c-Jun (Ser73)

          磷酸化原癌基因c-Jun抗體 phospho-c-Jun(Ser243)

          1號(hào)染色體開放閱讀框86抗體 C1orf86

          8號(hào)染色體開放閱讀框59抗體 C8ORF59

          磷酸化補(bǔ)體成分5受體1抗體 phospho-C5R1 (Ser338)

          癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子7抗體 CEACAM7

          磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體 Phospho-CEBP beta (Thr188)

          補(bǔ)體C6抗體 Complement component C6

          磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體 Phospho-CEBP beta (Thr188 + Thr235)

          核糖核酸酶A(RNase A)重組蛋白人小鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基苜蓿中華根瘤菌

          卡爾斯伯酵母 Saccharomyces carlsbergensis大鼠胰腺星狀細(xì)胞培養(yǎng)基

          小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基漢遜德巴利酵母 Bacillus subtilis

          大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii

          鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

          香菇 Lentinula edodes肝細(xì)胞HBV病毒株

          玉米桿菌 Lactobacillus zeae人破骨細(xì)胞培養(yǎng)基

          純白鏈霉菌 Streptomyces candidus大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

          嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus屎腸球菌 Enterococcus faecium

          SGC-7901, 人胃腺細(xì)胞系苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

          煙曲霉 Aspergillus fumigatus金色鏈霉菌 Streptomyces aureus

          R 1610(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)小鼠角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

          地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformisES-2(人卵巢透細(xì)胞細(xì)胞)

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