蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：脂蛋白脂酶(LPL)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Lipoprotein lipase (LPL)

LIPD; Lipase, Lipoprotein

型號：GOY-01D182

酶與激酶

代謝通路

心腦血管

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測分子量：32.6kDa

實際分子量：33kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：His55~Glu316 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：6.5

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant N-Acetylneuraminic Acid Synthase (NANS)  產(chǎn)品名稱：N-乙酰神經(jīng)氨酰酸合酶(NANS)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant N-Acetylgalactosaminidase Alpha (NAGa)  產(chǎn)品名稱：N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGa)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant N-Acetylgalactosaminidase Alpha (NAGa)  產(chǎn)品名稱：N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGa)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant NAD Kinase (NADK)  產(chǎn)品名稱：NAD激酶(NADK)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Methylenetetrahydrofolate Reductase (MTHFR)  產(chǎn)品名稱：亞甲基四氫還原酶(MTHFR)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant N-Methylpurine DNA Glycosylase (MPG)  產(chǎn)品名稱：N-甲基嘌呤DNA糖基化酶(MPG)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Ⅰ型補體受體抗體（C3b/C4b受體抗體） CD35

1號染色體開放閱讀框105抗體 C1orf105

趨化樣因子受體1抗體 CMKLR1

趨化樣因子受體1抗體 CMKLR1

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 phospho-beta Catenin (Ser33)

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 phospho-beta Catenin (Ser37)

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 phospho-beta Catenin (Thr41)

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 phospho-beta Catenin (Tyr333)

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 phospho-beta Catenin (Tyr86)

βA3/A1-crystallin蛋白抗體 beta Crystallin A3

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 phospho-beta Catenin (Tyr489)

γS-crystallin蛋白抗體 Beta crystallin S

脂蛋白脂酶(LPL)重組蛋白人豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

BT-474(人腺導(dǎo)管細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

宇佐美曲霉 Aspergillus usamii中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

人顱蓋造骨細(xì)胞培養(yǎng)基SK-CO-1(人結(jié)直腸腺細(xì)胞)

刺孢吸水鏈霉菌昆變種 Streptomyces hygrospinocus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

葡萄牙假絲酵母 Candida lusitaniae蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

RL95-2(人子宮內(nèi)膜細(xì)胞)STO(小鼠胚成纖維細(xì)胞)

粉擬青霉 Paecilomyces farinosus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

胎兒真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基香菇 Lentinula edodes

湯卜遜沙門氏菌 Salmonella thompson中國倉鼠肺成纖維樣細(xì)胞

人非小細(xì)胞肺腺細(xì)胞SCaBER(人膀胱鱗細(xì)胞)

蓋囊側(cè)耳 Pleurotus cystidiosus中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus人臍靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基