鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白大鼠公司正在出售的產(chǎn)品：人牙本質(zhì)唾液磷酸蛋白(DSPP)ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL人Disabled同系物2（Disabled homolog 2）ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL人多萜長(zhǎng)醇二磷酸寡糖蛋白環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶(DDOST)ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL

產(chǎn)品屬性：

 

 

產(chǎn)品名稱：鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白大鼠

英文名稱：Recombinant Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2)

PLA2G6; CaI-PLA2; GVI; INAD1; PNPLA9; Ca2+ Independent PLA2; 85 kDa Calcium-Independent Phospholipase A2; Phospholipase A2,group VI(Cytosolic,Calcium-Independent)

型號(hào)：GOY-01D192

酶與激酶

代謝通路

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：染色體

預(yù)測(cè)分子量：28.3kDa

實(shí)際分子量：32kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Leu481~Val702 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：9.9

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Lecithin Cholesterol Acyltransferase (LCAT)  產(chǎn)品名稱：脂酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Lecithin Cholesterol Acyltransferase (LCAT)  產(chǎn)品名稱：脂酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Branched Chain Alpha-Ketoacid Dehydrogenase Kinase (BCKDK)  產(chǎn)品名稱：支鏈α-酮酸脫氫酶(BCKDK)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Astacin Like Metallo Endopeptidase (ASTL)  產(chǎn)品名稱：龍蝦肽酶樣金屬內(nèi)肽酶(ASTL)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Acyloxyacyl Hydrolase (AOAH)  產(chǎn)品名稱：?；人崴饷?AOAH)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Agmatine Ureohydrolase (AGMAT)  產(chǎn)品名稱：胍基丁胺脲水解酶(AGMAT)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

 

 

 

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

中心體蛋白55kDa抗體 CEP55

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體 CCDC11

富含半與表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白2抗體 AVSD2

細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白2/腫瘤和微管相關(guān)蛋白抗體 CKAP2

染色質(zhì)修飾蛋白4B(4C)抗體 CHMP4B+CHMP4C

磷酸化非受體激酶c-Abl抗體 phospho-c-Abl (Tyr412)

磷酸化非受體激酶c-Abl抗體 phospho-c-Abl (Tyr226)

磷酸化非受體激酶c-Abl抗體 phospho-c-Abl (Tyr185)

柯薩奇病毒蛋白受體B抗體 Coxsackie Adenovirus Receptor

腫瘤抑制因子FBW7抗體 CDC4

酪蛋白激酶1γ2抗體 CSNK1G2

細(xì)胞粘附分子4抗體 Cell adhesion molecule 4

鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白大鼠炭黑曲霉 Aspergillus carbonariusPA319(人大腸細(xì)胞)

中國(guó)臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolensentis

巴蘑菇 Agaricus bisporus鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum節(jié)桿菌 Arthrobacter sp.

TT(人甲狀腺導(dǎo)管細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

蘇木素伊紅(HE)染色試劑盒大豆慢生根瘤菌

U251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管細(xì)胞)

土曲霉 Aspergillus terreus瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus

苜蓿中華根瘤菌馬杜拉放線菌 Actinomadura Sp.

大鼠小鼠雜合神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞噬夏孢歐文氏菌 Pantoea ananatis

小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）休哈塔假絲酵母 Candida shehatae

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum膠韌革菌