蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶(hù)要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱(chēng)：Recombinant Protein C (PROC)

PRO-C; VKDPC; PC; Vitamin K Dependent Protein C; Inactivator Of Coagulation Factors Va And VIIIa; Autoprothrombin IIA; Blood coagulation factor XIV; Activation peptide

型號(hào)：GOY-01D310

酶與激酶

血液病學(xué)

心腦血管

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：56.7kDa

實(shí)際分子量：80/50kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Lys197~Lys436 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：6.3

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱(chēng)：Recombinant Biliverdin Reductase B (BLVRB)  產(chǎn)品名稱(chēng)：膽綠素還原酶B(BLVRB)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱(chēng)：Recombinant Biliverdin Reductase A (BLVRA)  產(chǎn)品名稱(chēng)：膽綠素還原酶A(BLVRA)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱(chēng)：Recombinant Biliverdin Reductase A (BLVRA)  產(chǎn)品名稱(chēng)：膽綠素還原酶A(BLVRA)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱(chēng)：Recombinant Beta-1,4-N-Acetyl Galactosaminyl Transferase 2 (b4GALNT2)  產(chǎn)品名稱(chēng)：β-1,4-N-乙酰半乳糖胺基轉(zhuǎn)移酶2(b4GALNT2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱(chēng)：Recombinant Alpha-Methylacyl Coenzyme A Racemase (aMACR)  產(chǎn)品名稱(chēng)：α-甲基?；?aMACR)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱(chēng)：Recombinant Aconitase 1 (ACO1)  產(chǎn)品名稱(chēng)：順烏頭酸酶1(ACO1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

鈣激活氯離子通道蛋白3抗體 CLCA3

鈣粘蛋白14抗體 CDHF14

CD200受體抗體 CD200R

彈性1抗體 CELA1

干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體/細(xì)胞表面分化抗原抗體 c-Kit

CD99樣蛋白2抗體 CD99L2

鈣粘蛋白相關(guān)蛋白CTNNA3抗體 CTNNA3

緊密連接蛋白15抗體 Claudin 15

CHIC2蛋白抗體 CHIC2

磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶1抗體 phospho-CHEK1 (Ser286)

緊密連接蛋白12抗體 Claudin 12

磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體 Phospho-CHK2 (Ser28)

蛋白C(PROC)重組蛋白小鼠小檗堿WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)

副干酪桿菌 Lactobacillus paracasei嗜熱假諾卡氏菌 Pseudonocardia thermophila

P388D1(小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeA2(人腺樣囊性細(xì)胞)

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii少根根霉 Rhizopus arrhizus

屎腸球菌 Enterococcus faecium灰葡萄孢

純白鏈霉菌 Streptomyces candidus香菇 Lentinula edodes

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus嗜熱脂肪芽胞桿菌 Bacillus thermophilus

大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基小鼠牙細(xì)胞培養(yǎng)基

鏈霉菌 Streptomyces sp.NRK(大鼠腎細(xì)胞)

MDA-MB-231（ATCC來(lái)源）, 人腺細(xì)胞成人真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

海水產(chǎn)堿菌泡盛曲霉 Aspergillus awamori