產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D331 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Topoisomerase II (TOP2) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷(xiāo)售熱線 ——
15026555973 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2023-03-06 09:24:41瀏覽次數(shù):181
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D331 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Topoisomerase II (TOP2) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
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英文名稱:Recombinant Janus Kinase 1 (JAK1) 產(chǎn)品名稱:Janus激酶1(JAK1)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名稱:Recombinant Legumain (LGMN) 產(chǎn)品名稱:天冬酰胺內(nèi)肽酶(LGMN)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:Recombinant Xanthine Dehydrogenase (XDH) 產(chǎn)品名稱:脫氫酶(XDH)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名稱:Recombinant Napsin A Aspartic Peptidase (NAPSA) 產(chǎn)品名稱:Napsin A天冬肽酶(NAPSA)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Oxoguanine Glycosylase 1 (OGG1) 產(chǎn)品名稱:8-羥基糖苷酶1(OGG1)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D331 |
英文名稱:Recombinant Topoisomerase II (TOP2)
DNA topoisomerase 2-alpha; DNA topoisomerase II, alpha isozyme
型號(hào):GOY-01D331
酶與激酶
腫瘤免疫
發(fā)育科學(xué)
物種:Homo sapiens (Human,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測(cè)分子量:30.3kDa
實(shí)際分子量:33kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Ile923~Arg1148 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):6.2
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
有絲分裂著絲粒蛋白F抗體 CENPF
細(xì)胞分裂周期蛋白16抗體 CDC16
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拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白人宇佐美曲霉 Aspergillus usamii直邊正青霉 Eupenicillium lineolatum
SuperPolymer Rabbit&Mouse HRP Kit/Super Polymer-二步法IHC試劑盒黑曲霉 Aspergillus niger
解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞)H9c2大鼠心肌細(xì)胞(ATCC來(lái)源)
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
屎腸球菌 Enterococcus faecium蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae
小鼠腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)基SuperPolymer Rabbit&Mouse HRP Kit(DAB)/Super Polymer-二步法IHC試劑盒(帶DAB顯色液)
mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
鹽屋鏈霉菌 Streptomyces Sioyaensis巴斯德畢赤酵母 Pichia pastoris
植物桿菌 Lactobacillus plantarum人膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基
大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基
大孢綠僵菌=金龜子綠僵菌大孢變種 Metarhizium majarosporae=anisopliae var. majus中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe人前列腺細(xì)胞