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          上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>蛋白>>重組蛋白/RP>>拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白人

          拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白人

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2023-03-06 09:24:41瀏覽次數(shù):181

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          貨號(hào) GOY-01D331 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Topoisomerase II (TOP2)
          物種 Homo sapiens (Human,人)    
          拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:人干擾素誘導(dǎo)蛋白44(p44)ELISA試劑盒96T 0.78-50 ng/mL人干擾素誘導(dǎo)解旋酶C域蛋白1(Interferon-induced helicase C domain-containing protein 1)ELISA試劑盒96T 78-5000 pg/mL人整合素β1,ITG β1 ELISA試劑盒96T 15.6-1

          詳細(xì)介紹

          以下是相關(guān)產(chǎn)品:

          英文名稱:Recombinant Glyoxalase I (GLO1)  產(chǎn)品名稱:乙二醛酶Ⅰ(GLO1)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

          英文名稱:Recombinant Janus Kinase 1 (JAK1)  產(chǎn)品名稱:Janus激酶1(JAK1)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

          英文名稱:Recombinant Legumain (LGMN)  產(chǎn)品名稱:天冬酰胺內(nèi)肽酶(LGMN)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

          英文名稱:Recombinant Xanthine Dehydrogenase (XDH)  產(chǎn)品名稱:脫氫酶(XDH)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

          英文名稱:Recombinant Napsin A Aspartic Peptidase (NAPSA)  產(chǎn)品名稱:Napsin A天冬肽酶(NAPSA)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

          英文名稱:Recombinant Oxoguanine Glycosylase 1 (OGG1)  產(chǎn)品名稱:8-羥基糖苷酶1(OGG1)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          物種

          貨號(hào)

          拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白人

          Homo sapiens (Human,人)

          GOY-01D331

           

           

          英文名稱:Recombinant Topoisomerase II (TOP2)

          DNA topoisomerase 2-alpha; DNA topoisomerase II, alpha isozyme

          型號(hào):GOY-01D331

          酶與激酶

          腫瘤免疫

          發(fā)育科學(xué)

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          來(lái)源:原核表達(dá)

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

          亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)

          預(yù)測(cè)分子量:30.3kDa

          實(shí)際分子量:33kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

          片段與標(biāo)簽:Ile923~Arg1148 with N-terminal His Tag

          緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

          性狀:凍干粉

          純度:> 97%

          等電點(diǎn):6.2

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


          蛋白表達(dá)及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

          2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

          4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

          交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

          操作步驟:

          Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

           

          細(xì)胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個(gè)

          0.5 mL~1 mL

          5×106個(gè)

          0.2 mL~0.5 mL

           

           

          5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          公司正在出售的產(chǎn)品:

          有絲分裂著絲粒蛋白F抗體 CENPF

          細(xì)胞分裂周期蛋白16抗體 CDC16

          9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框115抗體 C9orf115

          CTDSPL蛋白抗體 CTDSPL

          CTDSPL2蛋白抗體 CTDSPL2

          乙酰酯酶相關(guān)蛋白抗體 CUTA

          卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83抗體 CCDC83

          二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白5抗體 CRMP5

          腦衰蛋白反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白4抗體 CRMP4

          卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白87抗體 CCDC87

          磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體 Phospho-CRMP2 (Thr514+Ser518)

          卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白92抗體 CCDC92

          拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白人宇佐美曲霉 Aspergillus usamii直邊正青霉 Eupenicillium lineolatum

          SuperPolymer Rabbit&Mouse HRP Kit/Super Polymer-二步法IHC試劑盒黑曲霉 Aspergillus niger

          解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

          FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞)H9c2大鼠心肌細(xì)胞(ATCC來(lái)源)

          豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

          屎腸球菌 Enterococcus faecium蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

          小鼠腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)基SuperPolymer Rabbit&Mouse HRP Kit(DAB)/Super Polymer-二步法IHC試劑盒(帶DAB顯色液)

          mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

          鹽屋鏈霉菌 Streptomyces Sioyaensis巴斯德畢赤酵母 Pichia pastoris

          植物桿菌 Lactobacillus plantarum人膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

          大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

          大孢綠僵菌=金龜子綠僵菌大孢變種 Metarhizium majarosporae=anisopliae var. majus中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

          粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe人前列腺細(xì)胞

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