產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D357 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Endothelial NOS (eNOS) |
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15026555973 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2023-03-06 09:43:28瀏覽次數(shù):244
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D357 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Endothelial NOS (eNOS) |
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D357 |
英文名稱:Recombinant Endothelial NOS (eNOS)
NOS3; ECNOS; NOS III; E-NOS; C-NOS; ENOS; CNOS; Constitutive NOS; Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial
型號(hào):GOY-01D357
酶與激酶
心腦血管
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測(cè)分子量:14.3kDa
實(shí)際分子量:15kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Glu888~Pro1001 (Accession # P70313) with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
英文名稱:Recombinant 15-Lipoxygenase-2 (15-LO-2) 產(chǎn)品名稱:花生四烯酸-15-脂加氧酶B(15-LO-2)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名稱:Recombinant Superoxide Dismutase 1 (SOD1) 產(chǎn)品名稱:超氧化物歧化酶1(SOD1)重組蛋白物種:Ovis aries; Ovine (Sheep,綿羊)
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英文名稱:Recombinant TTK Protein Kinase (TTK) 產(chǎn)品名稱:TTK蛋白激酶(TTK)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Glutaredoxin 3 (GLRX3) 產(chǎn)品名稱:谷氧還蛋白3(GLRX3)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
補(bǔ)體C3b-α鏈抗體 Complement C3b alpha' chain
補(bǔ)體C3b抗體 Complement C3 beta chain
CD3抗體 CD3E
著絲粒蛋白C1抗體 CENPC1
細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白 CDCA7
豬瘟病毒抗體 CSFV
16號(hào)染色體開放閱讀框72抗體 C16orf72
補(bǔ)體C4 γ 鏈蛋白抗體 Complement C4 gamma chain
補(bǔ)體C4b-A蛋白抗體 C4b-A
磷酸化整合素β2/Integrin β2抗體 Phospho-CD18 (Thr758)
補(bǔ)體C4d-A蛋白抗體 C4d-A
磷酸化整合素β2/Integrin β2抗體 Phospho-CD18 (Ser756)
內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)重組蛋白小鼠ES-2(人卵巢透細(xì)胞細(xì)胞)大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
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屎腸球菌 Enterococcus faeciumNIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系
大鼠表皮黑色素細(xì)胞培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
威爾酵母 Saccharomyces willianus毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
Yeast Protein Extraction Kit/酵母蛋白抽提試劑盒羽扇豆根瘤菌 Bradyrhizobium lupini
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeAmmonium Persulfate(APS)
大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基MDCK(犬腎細(xì)胞)
黃綠綠僵菌小孢變種 Metarhizium flavoviride var. minus大鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞培養(yǎng)基
粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe植物桿菌 Lactobacillus plantarum
苜蓿中華根瘤菌植物桿菌 Lactobacillus plantarum
CaEs-17, 人食管細(xì)胞株苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
灰色困難鏈霉菌 Streptomyces griseodifficilis家貓皮膚成纖維樣細(xì)胞