詳細介紹
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
鈣蛋白酶9(CAPN9)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2371 |
英文名稱:Recombinant Calpain 9 (CAPN9)
GC36; nCL4; Novel Calpain Large Subunit-4; Digestive tract-specific calpain; New calpain 4
型號:GOY-01D2371
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::n/a
預(yù)測分子量:37.4kDa
實際分子量:37kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Leu42~Ala340 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:5.0
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
單脫氨酶2(AMPD2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Adenosine Monophosphate Deaminase 2 (AMPD2)AMPD Isoform L物種:Mouse,小鼠
磷酸鹽胞苷轉(zhuǎn)移酶1β(PCYT1b)重組蛋白英文名稱:Recombinant Phosphate Cytidylyltransferase 1, Choline Beta (PCYT1b)CTB; CCTB; CCT-beta; Phosphorylcholine transferase B; CTP:phosphocholine cytidylyltransferase B物種:Mouse,小鼠
前列腺素I合酶(PTGIS)重組蛋白英文名稱:Recombinant Prostaglandin I Synthase (PTGIS)PGIS; CYP8A1; Prostacyclin Synthase; Prostacycline Synthetase; Prostagladin I2 Synthetase; PGI2 Synthetase; Cytochrome P450,Family 8,Subfamily A,Polypeptide 1物種:Human,人
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
皺枝孢 Cladosporium delicatulum熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
三葉豆紫檀苷(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Trifolirhizin
家貓肺成纖維樣細胞小鼠腺腫瘤細胞
桑皮苷A(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Mulberroside A
異常畢赤酵母 Pichia anomala球擬圓酵母 Torulopsis globosa
沙苑子苷A(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Complanatoside A
小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記)大鼠成骨細胞培養(yǎng)基
桑色素(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Morin
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
山梔苷甲酯(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Shanzhiside methylester
HLF-a(人肺細胞)MADB106(大鼠腺細胞)
商陸皂苷甲(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Esculentoside A
瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
芍藥內(nèi)酯苷(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥96.50%,標準品 Alibiflorin
刺孢吸水鏈霉菌 Streptomyces hygrospinosus佛羅里達側(cè)耳 Pleurotus florida
蛇床子素(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Osthole
鈣蛋白酶9(CAPN9)重組蛋白人液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基 Thiolglycollate Medium 250g
1瓶 H4-II-E-C3細胞株 H4-II-E-C3 低溫運輸和保存
2 ug pET-28a(+) pET-28a(+) 低溫運輸,-20℃保存
1瓶 HCT-116細胞株 HCT-116 低溫運輸和保存
大鼠白介素32(IL-32)免疫試劑盒
魚腎上腺素(EPI)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
1000mL SSC,20X SSC,20X 常溫保存
2×YT肉湯 2×YT Broth 250g
2 ug pYRP7 pYRP7 低溫運輸,-20℃保存
人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7/MAC25/PSF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
沙氏葡萄糖瓊脂 Sabouraud’s Glucose Agar 250g