蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Topoisomerase II Binding Protein 1 (TOPBP1)

TOP2BP1; DNA topoisomerase II-beta-binding protein 1

型號：GOY-01D2422

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：31.6kDa

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Met1~Lys250 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產(chǎn)品：

胸苷DNA糖基化酶(TDG)重組蛋白英文名稱：Recombinant Thymine DNA Glycosylase (TDG)G/T Mismatch-Specific Thymine DNA Glycosylase; Thymine-DNA glycosylase物種：Human，人

汗酸酶αL(IDUa)重組蛋白英文名稱：Recombinant Iduronidase Alpha L (IDUa)MPS1物種：Human，人

脯氨酰tRNA合成酶2(PARS2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Prolyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (PARS2)ProRS; Prolyl-tRNA synthetase; Proline tRNA Ligase 2,Mitochondrial物種：Mouse，小鼠

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

單孢蟲道酵母 Ambrosiozyma manospora甘藍黑腐病禾谷類致病變種 Xanthomonas campestris pv. cerealis

脫氫紫堇堿;去氫紫堇堿（標準品） 質量規(guī)格：HPLC≥97%，標準品 Dehydrocorydaline

 HK-2, 人腎皮質近曲小管上皮細胞大鼠肝星形細胞培養(yǎng)基

小檗紅堿（標準品） 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 Berberrubine

 香菇 Lentinula edodes黑曲霉 Aspergillus niger

去亞甲基小檗堿（標準品） 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 Demethyleneberberine

 中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolensentis

歐夾竹桃苷（標準品） 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 Oleandrin

 人胰腺細胞大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

乙;酰（標準品） 質量規(guī)格：HPLC≥99%,標準品 Olaquindox

 人前列腺上皮細胞培養(yǎng)基Raji(人Burkitt's淋巴瘤細胞)

乙;酰 質量規(guī)格：≥98%,BR Olaquindox

 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae桿菌屬 Lactobacillus sp.

路路通（標準品） 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 Liquidambaric acid

 栗褐鏈霉菌 Streptomyces badius根瘤菌 Rhizobium sp.

近(標準品） 質量規(guī)格：含量測定 Analgin

拓撲異構酶Ⅱ結合蛋白1(TOPBP1)重組蛋白人人毒蕈堿型乙酰受體M2(mAChRM2)自身抗體免疫試劑盒進口、分裝

2 ug pLVX-Tet-3G pLVX-Tet-3G 低溫運輸，-20℃保存

人纖維介素蛋白(fgl2)免疫試劑盒進口、分裝

去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽乳糖蔗糖瓊脂 DCLS Agar 250g

1g 二腺 ADP Na2 -20℃保存

50T 大腸彎曲桿菌、海鳥彎曲桿菌16S rRNA基因熒光PCR檢測試劑盒(探針法)  低溫運輸，-20℃保存

大鼠強啡肽(Dyn)免疫試劑盒

100mL ACES Buffer，0.5M,pH7.0  ACES Buffer，0.5M,pH7.0  常溫保存

250mL Acetate Buffer（乙酸緩沖液），1M,pH5.5   Acetate Buffer，1M,pH5.5   常溫保存

CHO培養(yǎng)基基礎 CHO Medium Base 250g

1瓶 L6565細胞株 L6565 低溫運輸和保存