蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Phosphatidic Acid Phosphatase Type 2B (PPAP2B)

Dri42; LPP3; PAP-2b; PAP2-b; PAP2-beta; VCIP; Lipid phosphate phosphohydrolase 3; Vascular endothelial growth factor and type I collagen-inducible protein

型號：GOY-01D2516

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：Golgi Apparatus; Membrane;multi-pass Membrane Protei

預(yù)測分子量：19.3kDa

實際分子量：19.3kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ser57~Ser194 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：9.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

高分子量激肽原(HMWK)重組蛋白英文名稱：Recombinant High Molecular Weight Kininogen (HMWK)Williams-Fitzgerald-Flaujeac Factor; Fitzgerald Factor; HMWK-Kallikrein Factor物種：Human，人

多功能肽酶2(PSMB9)重組蛋白英文名稱：Recombinant Proteasome subunit beta type-9 (PSMB9)LMP2; Proteasome(Prosome,Macropain)Subunit Beta Type 9; Macropain chain 7; Multicatalytic endopeptidase complex chain 7; Really interesting new gene 12 protein; Large Multifunctional Peptidase 2物種：Human，人

羧肽酶O(CPO)重組蛋白英文名稱：Recombinant Carboxypeptidase O (CPO)酶與激酶物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞（低分化）小鼠垂體瘤細胞

鹽貝尼地平（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 Benidipine Hydrochloride

 葡萄汁有孢漢遜酵母 Hanseniaspora uvarum人腦膜細胞培養(yǎng)基

（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：供UV法含量測定用 Meisoindigo

 吳茱萸次堿厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia

（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 Indobufen

 豬苓熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

鹽丁螺環(huán)（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 Buspirone Hydrochloride

 大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞培養(yǎng)基HK-2(人腎小管上皮細胞)

鹽曲普利啶（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 Triprolidine hydrochloride

 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis

(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Milrinone

 涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis香菇 Lentinula edodes

壬二（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：檢查 Azelaic acid

 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細胞)人胰腺細胞

普利雜質(zhì)S9780（培利拉）（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗用 Perindoprilat

磷脂酸磷酸酶2B(PPAP2B)重組蛋白人人白介素23(IL-23)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

人對氧磷-3(PON3)免疫試劑盒進口、組裝

1000U T4 核酸內(nèi)切 V T4 Endonuclease V -20℃保存

大鼠γ谷-半胱合成(γ-GCS)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

2 ug pQE-80 pQE-80 低溫運輸，-20℃保存

人含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪激1(Tie-1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

1mL 溶液,50mg/mL Dexamethasone DXM Solution -20℃避光保存

3%氯化鈉MR-VP培養(yǎng)基 3% NaCl MR-VP Medium 20支

2 ug pCMV-SPORT6 PPP2R3A pCMV-SPORT6 PPP2R3A 低溫運輸，-20℃保存

100mL TABS Buffer,0.2M,pH8.0   TABS Buffer,0.2M,pH8.0   常溫保存

人音猬因子N端(Shh-N)免疫試劑盒進口、組裝