詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
羧酸酯酶3(CES3)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D2565 |
英文名稱:Recombinant Carboxylesterase 3 (CES3)
Br3; ES31; Brain carboxylesterase 3; Esterase 31; Liver carboxylesterase 31 homolog
型號(hào):GOY-01D2565
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::分泌
預(yù)測(cè)分子量:28.7kDa
實(shí)際分子量:29kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Pro344~Leu565 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):6.3
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
前列腺蛋白類(lèi)脂肪酶B(LIPB)重組蛋白英文名稱:Recombinant Lipophilin B, Prostatein Like (LIPB)SCGB1D2; LPHB; Secretoglobin Family 1D Member 2物種:Human,人
激活亞基3(PSME3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Proteasome Activator Subunit 3 (PSME3)Ki; PA28G; REG-GAMMA; 11S regulator complex subunit gamma; Activator of multicatalytic protease subunit 3; Ki nuclear autoantigen; Proteasome activator 28 subunit gamma物種:Human,人
核糖核酸酶H2亞基A(RNASEH2A)重組蛋白英文名稱:Recombinant Ribonuclease H2 Subunit A (RNASEH2A)Rnase-H2A; RNASEHI; RNHIA; RNHL; AGS4; Ribonuclease H2,Large Subunit; Aicardi-Goutieres Syndrome 4; Ribonuclease HI large subunit物種:Human,人
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
ZR-75-30(人腺細(xì)胞)TG-905(人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)
垂體腺苷環(huán)化酶激活肽-27(6-27),人,雞,小鼠,豬,大鼠 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)
炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
垂體腺苷環(huán)化酶激活肽-38(16-38),人,雞,小鼠,綿羊,豬,大鼠 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)
K562全細(xì)胞裂解液球形芽胞桿菌 Bacillus sphaericus
胰多肽,人 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Pancreatic Polypeptide,human
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii猴菌
垂體腺苷環(huán)化酶激活肽相關(guān)肽(1-29),大鼠 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeF81(貓腎細(xì)胞)
胰多肽,大鼠 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Pancreatic Polypeptide, rat
小單孢菌 Micromonospora sp.球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
甲狀旁腺激素(1-38),人 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Parathyroid Hormone (1-38),human
非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
五肽胃泌素 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Pentagastrin
熱帶假絲酵母 Candida tropicalisRS1(大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞)
肽YY,人 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Peptide YY, Human
羧酸酯酶3(CES3)重組蛋白小鼠250g D- 果糖 D-Fructose 室溫干燥保存
Casman瓊脂培養(yǎng)基 Casman Agar Medium 250g
酵母粉瓊脂 Yeast Extract Agar 250g
2 ug pRNATin-H1.2/Hygro pRNATin-H1.2/Hygro 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
TSN瓊脂 TSN Agar 250g
酪蛋白胨大豆吐溫20培養(yǎng)基 Casein DigestSoy LecithinPolysorbate 20 Medium 250g
石斑魚(yú)卵黃蛋白原(VTG)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
大鼠轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
大鼠醇脫氫(SDH)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
2000 U 限制性內(nèi)切EcoRI Restriction Endonuclease -20℃保存