詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
泛素樣修飾激活酶5(UBA5)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2628 |
英文名稱:Recombinant Ubiquitin Like Modifier Activating Enzyme 5 (UBA5)
UBE1DC1; ThiFP1; UFM1-activating enzyme; Ubiquitin-Activating Enzyme E1-Domain Containing 1; Ubiquitin-activating enzyme E1 domain-containing protein 1
型號:GOY-01D2628
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::分泌
預(yù)測分子量:23.1kDa
實際分子量:23kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Met1~Lys173 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:6.1
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Calpain 1 (CAPN1)產(chǎn)品名稱:鈣1(CAPN1)重組蛋白物種:Human,人PIG30; CANPL1; MuCANP; MuCL; Calpain 1, Large Subunit; Calpain-1 Catalolar-calpain
Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase 11 (MAPK11)產(chǎn)品名稱:絲裂原激活蛋白激酶11(MAPK11)重組蛋白物種:Human,人P38B; P38Beta2; PRKM11;
Recombinant Myosin Light Chain Kinase 3 (MYLK3)產(chǎn)品名稱:肌球蛋白輕鏈激酶3(MYLK3)重組蛋白物種:Human,人MLCK3; MLCK; MLCK2; caMLCK; MLC Kinad Ca/CaM kinase
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
淺玫瑰鏈霉菌 Streptomyces roseolus
菲啶(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) Phenanthridine
狗腎細(xì)胞英文名稱:
2,2'-聯(lián)-4-勒皮啶 質(zhì)量規(guī)格: 2,2'-Bi-4-lepidine
凝結(jié)芽孢桿菌 Bacillus coagulans
2,2'-二辛可寧(>98.0%(HPLC)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 2,2'-Bicinchoninic Acid
大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞 Rattus
2,2'-聯(lián)(>95.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 2,2'-Bipyrimidyl
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
1,2-二甲基-3-基化咪唑鎓(>98.0%(HPLC)(T)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 1,2-Dimethyl-3-propylimidazolium Iodide
HAN(人羊膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
乙基三基化銨(>99.0%(T)) 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(T) Ethyltripropylammonium Iodide
酒假絲酵母 Candida kefyr
乙基三基化鏻(>98.0%(HPLC)(T)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) Ethyltriphenylphosphonium Iodide
豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum
1-己基-2,3-二甲基咪唑啉化物(>98.0%(HPLC)(T)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 1-Hexyl-2,3-dimethylimidazolium Iodide
泛素樣修飾激活酶5(UBA5)重組蛋白人2 ug pBiFC-CC155 pBiFC-CC155 低溫運輸,-20℃保存
1 mg Quin-2 AM Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
大鼠甲羥戊酸5-焦脫羧(MDD)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
現(xiàn)隱肉湯 Presence Absence Broth 250g
大鼠彈性蛋白(ELN)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
綿羊褪黑素(MT)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
10次 大提無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout Maxi Column Endo-free Plasmid DNAOUT 常溫保存(RNase A溶液4℃保存)
100mg 遺傳 G-418 Sulfate (Geneticin) 4℃保存
麥康凱瓊脂3號 Maconkey Agar No.3 250g
2 ug pMKO.1-puro hTERT shRNA pMKO.1-puro hTERT shRNA 低溫運輸,-20℃保存
100mL Polyethylene Glycol (PEG) Solution, 50% Polyethylene Glycol (PEG) Solution, 50% 常溫保存