詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
多巴脫羧酶(DDC)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D2650 |
英文名稱:Recombinant Dopa Decarboxylase (DDC)
AADC; Aromatic L-Amino Acid Decarboxylase; DOPA decarboxylase
型號(hào):GOY-01D2650
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::分泌
預(yù)測(cè)分子量:32.2kDa
實(shí)際分子量:32kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Lys58~Thr320 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):5.4
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Lipase, Gastric (LIPF)產(chǎn)品名稱:胃脂酶(LIPF)重組蛋白物種:Human,人HGL; HLAL; Gastric lipase
Recombinant Spermidine/Spermine N1-Acetyltransferase 1 (SAT1)產(chǎn)品名稱:精脒/精胺N1-乙?;D(zhuǎn)移酶1(SAT1)重組蛋白物種:Mouse,小鼠DC21; KFSD; SAT; SSAT; SSAT-1; Diamine Acetyltransferase 1; Polyamine N-acetyltransferase 1; Putrescine acetyltransferase
Recombinant Phospholipid Scramblase 4 (PLSCR4)產(chǎn)品名稱:磷脂爬行酶4(PLSCR4)重組蛋白物種:Human,人TRA1; GIG43; Cell growth-inhibiting gene 43 protein; Cell growth-inhibiting gene 43 protein; Ca(2+)-dependent phospholipid scramblase 4
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
灰色裂孢鏈霉菌 Streptomyces griseosegmentosus
酞菁(>93.0%(N)) 質(zhì)量規(guī)格:>93.0%(N) Phthalocyanine
人卵巢細(xì)胞英文名稱:
顏料藍(lán)15,酞菁藍(lán)B 質(zhì)量規(guī)格: Pigment Blue 15
異常漢遜酵母 Hansenula anomala
酞菁鉛(II)(>95.0%(T)) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) Lead(II) Phthalocyanine
小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)
顏料綠 7 質(zhì)量規(guī)格: Pigment Green 7
涇陽(yáng)鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis
酞菁(>95.0%(T)) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) Zinc Phthalocyanine
A3(人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
酞菁鐵(II)(>95.0%(T)) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) Iron(II) Phthalocyanine
糖化酵母 Saccharomyces diastaticus
酞菁二鈉 質(zhì)量規(guī)格: Disodium Phthalocyanine
苜蓿中華根瘤菌
二酞菁錫(IV) 質(zhì)量規(guī)格: Tin(IV) Phthalocyanine Dichloride
多巴脫羧酶(DDC)重組蛋白小鼠人核苷化1(UPP1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
2 ug pTrc99a pTrc99a 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
堿性L-G培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250g
2 ug pGL4.75 pGL4.75 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
人抗補(bǔ)體1q抗體(anti-C1q-antibody)免疫試劑盒
2 ug pCMS-EGFP pCMS-EGFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
快速硫化氫試驗(yàn)瓊脂 H2S Test Medium Agar 250g
2 ug pCAMBIA3300 pCAMBIA3300 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
15mL 非凍型尿液DNA保存液 Urine DNALOCKER 室溫
牛熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
2 ug pLJM1 pLJM1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存