詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
蛋白酶激活亞基4(PSME4)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2711 |
英文名稱:Recombinant Proteasome Activator Subunit 4 (PSME4)
PA200; Proteasome activator PA200
型號:GOY-01D2711
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::分泌
預(yù)測分子量:27.9kDa
實際分子量:26kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Leu1634~Ala1843 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:6.8
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽(Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Methylthioadenosine Phosphorylase (MTAP)產(chǎn)品名稱:甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)重組蛋白物種:Mouse,小鼠MSAP; S-methyl-5'-thioadenosine phosphorylase
Recombinant Cysteinyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (CARS2)產(chǎn)品名稱:半胱氨酰tRNA合成酶2(CARS2)重組蛋白物種:Rat,大鼠CysRS; Cysteinyl-tRNA synthetase; Cysteine tRNA Ligase 2,Mitochondrial
Recombinant Toll Like Receptor 4 (TLR4)產(chǎn)品名稱:Toll樣受體4(TLR4)重組蛋白物種:Cattle,牛CD284; TOLL; HToll
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
I型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
腺苷 2′(3′)-單混合異構(gòu)體 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Adenosine 2'(3')-monophosphate mixed isomers
大鼠正常肝細胞英文名稱:
腺苷5'-二核糖鈉 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Adenosine 5'-diphosphoribose sodium salt
異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala
8-氨基腺嘌呤核苷 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 8-Amino Adenosine
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
8-疊-環(huán)二腺苷-核糖 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 8-Azido-cyclic adenosine diphosphate-ribose
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
α-腺苷 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 α-Adenosine
NCI-H460(人肺細胞)5×106cells/瓶×2
腺苷 3’-單鈉鹽 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Adenosine 3'-monophosphate sodium salt
Raji(人Burkitt's淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2gersion
腺苷 3',5'-二鈉鹽 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Adenosine 3',5'-diphosphate sodium salt
Dami(人巨核細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
腺苷 2',5'-二鈉鹽 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Adenosine 2',5'-diphosphate sodium salt
蛋白酶激活亞基4(PSME4)重組蛋白人1瓶 PLC/PRF/5細胞株 PLC/PRF/5 低溫運輸和保存
硝酸鹽還原試劑盒 5ml*4
人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA(dsDNA)抗體(IgM)免疫試劑盒進口、分裝
1張 硝酸纖維素膜,13×20 cm(Amersham) Nitrocellulose Membrane 常溫
豬胰淀粉α2(PAMY α2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
2 ug pIRES-hrGFP-1 (Vitality) pIRES-hrGFP-1 (Vitality) 低溫運輸,-20℃保存
50mL EGTA Solution(EGTA溶液),0.5M,pH8.0 EGTA Solution,0.5M,pH8.0 常溫保存
人生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生長刺激因子(GROα/CXCL1/MGSA)免疫試劑盒進口、分裝
人層連蛋白/板層素(LN)免疫試劑盒進口、分裝
100mL 酪蛋白溶液 Casein Blocking Solution -20℃保存
霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基 1000(ML)