詳細介紹
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
K-乙酰轉(zhuǎn)移酶2B(KAT2B)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2720 |
英文名稱:Recombinant K-Acetyltransferase 2B (KAT2B)
PCAF; P/CAF; GCN5; GCN5L; P300/CBP-Associated Factor; Histone acetyltransferase PCAF; Lysine acetyltransferase 2B
型號:GOY-01D2720
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::細胞核, 細胞質(zhì)
預(yù)測分子量:26.0kDa
實際分子量:26kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Ala643~Lys832 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:9.5
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Caspase 10 (CASP10)產(chǎn)品名稱:胱天10(CASP10)重組蛋白物種:Human,人ALPS2; FLICE2; MCH4; Apoptosis-Related Cysteine Peptidase; Cysteinyl Aspartate Specific Proteinases 10; FAS-associated death domain interleukin-1B-converting enzyme 2
Recombinant Spermidine Synthase (SRM)產(chǎn)品名稱:亞精胺合酶(SRM)重組蛋白物種:Human,人SPS1; SRML1; SPDSY; Putrescine aminopropyltransferase
Recombinant Acid Phosphatase 5, Tartrate Resistant (ACP5)產(chǎn)品名稱:耐酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)重組蛋白物種:Rat,大鼠TRAP; TrATPase; Tartrate Resistant Acid Phosphatase; Type 5 acid phosphatase
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
BE(2)-M17(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
甲酯 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Atorvastatin Methyl Ester
小鼠成纖維細胞(EGFP標(biāo)記)
卓斯汀-13C,d3 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Azelastine-13C,d3
人胃細胞英文名稱:BGC-803
(S)-鹽卓斯汀 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 (S)-Azelastine Hydrochloride
Hanks’ Balanced Salt Solution (with Ca2+& Mg2+)規(guī)格:500ml
N-去甲卓斯汀 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 N-Desmethyl Azelastine
M17/M17 Agar牛奶和制品中菌檢測和分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
(R)-鹽卓斯汀 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 (R)-Azelastine Hydrochloride
人脈絡(luò)膜血管細胞培養(yǎng)基100mL
9-去氧-9a-雜-同型紅A 去甲阿奇 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 9-Deoxo-9a-aza-9a-homo Erythromycin A Desmethyl Azithromycin
腸道菌計數(shù)/結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡聚糖/VRBDA腸道菌計數(shù)和腸桿菌科鑒別250克國產(chǎn)/進口
阿奇 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Azithromycin
人鼻咽母系細胞英文名稱:CNE-2Z
阿奇-d3 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Azithromycin-d3
K-乙酰轉(zhuǎn)移酶2B(KAT2B)重組蛋白人1瓶 MDBK細胞株 MDBK 低溫運輸和保存
人基質(zhì)金屬蛋白3/基質(zhì)裂解素1(MMP3/STR1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒進口、分裝
250mL Blocking Reagent with Triton X-100 & Fetal Calf Serum Blocking Reagent with Triton X-100 & Fetal Calf Serum 常溫保存
1瓶 P388D1細胞株 P388D1 低溫運輸和保存
兔子前白蛋白(PA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
含90ml鹽緩沖液均質(zhì)袋 Phosphate Buffered Saline 10個/包
小鼠白介素-5(IL-5)免疫試劑盒進口、組裝
50T 口蹄疫病毒亞洲1型PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
25g 核黃素
人四連接素(CLEC3B)免疫試劑盒進口、組裝