詳細介紹
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
脂肪酸羥化酶(FAAH)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D2772 |
英文名稱:Recombinant Fatty Acid Hydroxylase (FAAH)
FAXDC1; FA2H; Fatty Acid 2-Hydroxylase; Fatty Acid Hydroxylase Domain Containing 1; Fatty acid alpha-hydroxylase
型號:GOY-01D2772
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::細胞膜
預測分子量:42.8kDa
實際分子量:46kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Asp57~Thr167 with N-terminal His and GST Tag
緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:4.7
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關產(chǎn)品:
Recombinant Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (NOS2)產(chǎn)品名稱:誘導型一氧化氮合酶(NOS2)重組蛋白物種:Human,人NOS2A; INOS; HEP-NOS; I-NOS; Hepatocytes Oxide Synthase; Peptidyl-cysteine S-nitrosylase NOS2
Recombinant Cluster Of Differentiation 15 (CD15)產(chǎn)品名稱:CD15分子(CD15)重組蛋白物種:Mouse,小鼠FUT4; 3FAL; FCT3A, ELFT, SSEA-1, LeX; Lewis x; Fucosyltransferase 4; Stage Specific Embryonic Antigen 1; 3-Fucosyl-N-Acetyl Lactosamine; Alpha(1,3)Fucosyltransferase,Myeloid-Specific
Recombinant Geranylgeranyl Diphosphate Synthase 1 (GGPS1)產(chǎn)品名稱:異戊二烯基二磷酸合酶1(GGPS1)重組蛋白物種:Human,人GGPPS1; (2E,6E)-farnesyl diphosphate synthase; Dimethylallyltranstransferase; Farnesyltranstransferase; Geranylgeranyl diphosphate synthase; Geranyltranstransferase
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Vero(非洲綠猴腎細胞)5×106cells/瓶×2
外消旋甲狀腺素鈉 質量規(guī)格:美國進口 DL-Levothyroxine sodium
胰胨大豆胨固綠/胰蛋白胨大豆快綠/胰蛋白胨大豆固綠/Tryptic Soy Fast Green Agar濾膜細菌總數(shù)的測定和分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
β-煙酰腺嘌呤二核苷鈉鹽 質量規(guī)格:美國進口 β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate sodium salt
J774A.1(小鼠單核巨噬細胞)5×106cells/瓶×2
9-(2-)腺嘌呤 質量規(guī)格:美國進口 9-(2-Hydroxyethyl)adenine
RTE(大鼠氣管上細胞)5×106cells/瓶×2
腺嘌呤二水化合物 質量規(guī)格:美國進口 Adenine Hemisulfate Dihydrate
NCI-H446(人小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
3-乙基-d5-腺嘌呤 質量規(guī)格:美國進口 3-Ethyl-d5-adenine
TF-1(人血液白血病細胞)5×106cells/瓶×2
3-甲基-d3-腺嘌呤 質量規(guī)格:美國進口 3-Methyl-d3-adenine
L Wnt-3A(小鼠下結締組織細胞)5×106cells/瓶×2
N1-氧基-腺嘌呤 質量規(guī)格:美國進口 Adenine-N1-Oxide
人絨毛膜毛細血管內(nèi)細胞
9-(2-羥基-d6)腺嘌呤 質量規(guī)格:美國進口 9-[2-(Hydroxypropyl-d6] Adenine
脂肪酸羥化酶(FAAH)重組蛋白小鼠2 ug pAcAd5 9.2-100 pAcAd5 9.2-100 低溫運輸,-20℃保存
1g 卵白蛋白 Ovalbumin 4℃保存
植物B6(VB6)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
小鼠胰蛋白-1(trypsin-1)免疫試劑盒進口、分裝
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基 Rose Bengal Agar Medium 250g
人白介素22(IL-22)免疫試劑盒
100mL CAPS Buffer,0.5M,pH9.0 CAPS Buffer,0.5M,pH9.0 常溫保存
2 ug pSecTag 2A pSecTag 2A 低溫運輸,-20℃保存
人類白細胞抗原B27(HLA-B27)免疫試劑盒進口、組裝
人內(nèi)皮細胞特異分子-1(ESM-1)免疫試劑盒
0.5 mg LPS (TLR4激活劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存