蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Sialyltransferase 1 (SIAT1)

CD75; ST6GAL1; ST6Gal I; ST6GalI; B-cell antigen CD75; Beta-galactoside alpha-2,6-sialyltransferase 1; ST6 Beta Galactosamide Alpha-2,6-Sialyltranferase 1

型號：GOY-01D2952

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞膜, 分泌

預測分子量：47.3kDa

實際分子量：47kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Lys27~Cys406 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：9.3

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

Recombinant Lipase A, Lysosomal Acid (LIPA)產品名稱：溶酶體酸脂肪酶A(LIPA)重組蛋白物種：Mouse，小鼠LAL; CESD; Lipase A,Lysosomal Acid,Cholesterol Esterase(Wolman Disease); Acid Cholesteryl Ester Hydrolase; Lysosomal acid lipase/cholesteryl ester hydrolase

Recombinant Protein O-Fucosyltransferase 1 (POFUT1)產品名稱：蛋白O-巖藻糖基轉移酶1(POFUT1)重組蛋白物種：Human，人O-FUT; O-Fuc-T; FUT12; GDP-Fucose Protein O-Fucosyltransferase 1; Peptide-O-fucosyltransferase 1

Recombinant Carboxylesterase 1 (CES1)產品名稱：羧酸酯酶1(CES1)重組蛋白物種：Human，人ACAT; CEH; CES2; HMSE1; PCE1; SES1; TGH; Retinyl ester hydrolase; Serine esterase 1; Triacylglycerol hydrolase; Egasyn; Cocaine carboxylesterase; Liver Carboxylesterase 1

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

YAC-1(小鼠淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2

羅-d3 質量規(guī)格：美國進口 Ronidazole-d3

 羊膽鹽/Bile salt from sheepBR25克國產/進口

維生素K1-d7 質量規(guī)格：美國進口 Vitamin K1-d7

 NCI-H1688(人典型小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2

二氫維生素K1 質量規(guī)格：美國進口 Dihydrovitamin K1

 SF767(人腦瘤細胞)5×106cells/瓶×2

維生素K1 2,3-環(huán)氧化物 質量規(guī)格：美國進口 Vitamin K1 2,3-Epoxide

 NC膜(0.22um)30cm × 3m，15cm x 20cm30cm × 3m，15cm x 20cmgersion

他丁 質量規(guī)格：美國進口 Cilastatin

 A2(人腺樣囊性細胞)5×106cells/瓶×2

丁鈉 質量規(guī)格：美國進口 Cilastatin sodium

 LS 180(人結腸腺細胞)5×106cells/瓶×2

- 質量規(guī)格：美國進口 Oxcarbazepine Enol-sulfate

 HSC-T6(大鼠肝星形細胞)5×106cells/瓶×2

-D4(主要的) 質量規(guī)格：美國進口 Oxcarbazepine-D4 (Major)

唾液酸轉移酶1(SIAT1)重組蛋白人2 ug pWPXL pWPXL 低溫運輸，-20℃保存

人補體片斷4b(C4b)免疫試劑盒

皰肉培養(yǎng)基基礎 Cooked Meat Medium Base 250g

10塊 LB平板培養(yǎng)基（LB-Amp平板） LB Petri Dish 低溫

250mL Gelatin Veronal Buffer with Mg++ and EGTA (GVBMG)   Gelatin Veronal Buffer with Mg++ and EGTA (GVBMG)   常溫保存

人FMS樣酪激3配體(Flt-3L)免疫試劑盒

50次 液體樣品RNAout Liquid Sample RNAOUT 4℃保存

2 ug pCDFDuet-1 pCDFDuet-1 低溫運輸，-20℃保存

人表皮生長因子(EGF)免疫試劑盒進口、分裝

50次 柱式BAC DNAout  Column BAC DNAOUT 常溫保存(RNase A溶液4℃保存)

50次 柱式植物RNA-DNA雙提試劑盒