概念
免疫組化，免疫組織化學技術(shù) (immunohistochemistry) ，是利用抗原抗體反應，通過使標記抗體的顯色劑顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原，對蛋白定位，定性的實驗技術(shù)。
愛必信組化二抗試劑盒優(yōu)點
圖 abs957即用型高效免疫組化二抗試劑盒
1、基于聚合物技術(shù)+一抗放大劑，高敏感性，一抗可再稀釋2-4倍！
2、非生物素檢測系統(tǒng)，更低背景！
3、快速便捷，更短孵育時間！
4、abs957單品文獻90+，認可度高！用的放心！
組分
組分編號 | 組分名稱 | 規(guī)格 | 數(shù)量 |
A | 過氧化氫 | 5mL | 1 |
B | 超級封閉液 | 5mL | 1 |
C | 一抗放大劑 | 5mL | 1 |
D | 酶標二抗聚合物 | 5mL | 1 |
E | DAB A液 | 5mL | 1 |
F | DAB B液 | 160uL | 1 |
額外準備一抗（來源于小鼠或兔子）、PBS 。
該試劑盒組分可用于50張片子，適用于一抗來源為小鼠和兔子的樣本（注意，不是樣本來源），DAB顯色。
實驗前準備
圖 樣本處理
1、取出固定好的樣本，流水沖洗3次，每次5min；
2、脫水、透明、浸蠟處理
75%乙醇(1h)——85%乙醇(1h)——95%乙醇(1h)——100%乙醇(50min)——100%乙醇(50min)——100%乙醇(50min)——二甲苯(40min)——二甲苯(40min)——二甲苯(40min)——63℃石蠟(50min)——63℃石蠟(50min)——63℃石蠟(50min)。
3、包埋處理
脫水結(jié)束后放入預熱的包埋機，按要求確定包埋方向進行包埋；
4、玻片做好編號標記；
5、切片：按照切片要求制備切片,切片厚度一般為3-5um；
6、攤片：用毛筆輕托放在46度水浴中攤片；
7、撈片、烤片：切片上組織充分展開后撈片，后置入60℃烘箱內(nèi)進行烤片（（烤片時間視組織類型而定，一般組織30min即可，骨組織等要延長時間至1h）），之后便可以進行脫蠟。
操作步驟
圖 免疫組化實驗流程
說明：所有的步驟在室溫下操作，加試劑可以直接滴瓶滴定，也可以用移液器，一滴=30-40uL。
1、脫蠟、水化組織切片二甲苯(5min)——二甲苯(5min)——二甲苯(5min)——100%乙醇(5min)——100%乙醇(5min)——95%乙醇(3min)——85%乙醇(3min)——75%乙醇(3min)——去離子水(5min)
2、PBS洗2-3次各5min；
3、抗原修復：根據(jù)所應用的一抗的特殊要求，對組織切片進行預處理；（抗原修復：將脫蠟好的切片置入抗原修復液（根據(jù)一抗說明書要求選擇用檸檬酸鈉或者EDTA），在高壓鍋內(nèi)進行高溫抗原修復，高壓鍋加熱至飽壓，然后繼續(xù)加熱5min，關閉電源，10min后取出染色盒，室溫冷卻30min或者使用微波修復，將抗原修復完的切片組織周圍擦干，用組化筆畫上阻水圈）
4、PBS洗2-3次各5min；
5、內(nèi)源性的過氧化物酶封閉：加入100uL A 液孵育10min，阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，以減少非特異性背景染色；
6、PBS洗2-3次各5min；
7、血清封閉：加入100uL B 液孵育5min來減少非特異性染色。注意：此步驟不要超過10min；如果一抗在含有5％至10％正常山羊血清的緩沖液中稀釋，則此步驟可以省略。
8、PBS洗2-3次各5min；
9、一抗孵育：加一抗，室溫或37℃孵育20min，用量以浸沒樣本區(qū)域為準，可靈活調(diào)節(jié)；
10、PBS洗2-3次各5min；
11、一抗放大劑孵育：加入100uL C 液孵育10min；
12、PBS洗2-3次各5min；
13、二抗孵育：加入100uL D 液室溫或37℃孵育10min。注意：此液對光敏感，注意避光。
14、PBS洗2-3次各5min；
15、DAB試劑配制：配制新鮮底物液：將30uL的F液和1mL的E液充分混合，即配制成新鮮底物液（該底物液可存放2周）。
16、DAB顯色：加入100uL新鮮底物液, 孵育5min。注意：DAB顯色時間需要鏡下控制，選擇最佳顯色時間，做好防護。
17、終止顯色：去離子水沖洗；
18、復染：蘇木素復染3min左右、自來水沖洗，1%鹽酸酒精中分化1s，自來水沖洗；
19、脫水透明：80%、95%、100%、100%酒精，每步5min、二甲苯5min、兩次；
20、中性樹膠封片 蓋住玻片時從一端傾斜45°，小心不要產(chǎn)生氣泡。
免疫組化產(chǎn)品推薦
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs957 | 即用型高效免疫組化二抗試劑盒 | 5mL |
abs996 | 即用型免疫組化二抗試劑盒（鼠兔通用型） | 100mL |
abs998 | 即用型免疫組化二抗試劑盒（抗兔） | 100mL |
abs997 | 即用型免疫組化二抗試劑盒（抗小鼠） | 100mL |
abs9792 | 組化雙染試劑盒 | 50T |
abs929 | 免疫組化筆 | 1支 |
abs9785 | 免疫組化筆plus | 1支 |
abs9179 | 4%多聚甲醛（通用型組織固定液） | 500mL |
abs9756 | OCT包埋劑 | 110mL |
abs9342 | Tris-EDTA抗原修復液(10×,pH9.0) | 100mL |
abs9248 | 檸檬酸鈉抗原修復液(50×) | 100mL |
abs9299 | 一抗二抗稀釋液 | 100mL |
abs9214 | 蘇木素染液 | 100mL |
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WB相關：ECL發(fā)光液、預染marker、預制膠；IHC相關：二抗試劑盒、組化筆；IP/CoIP試劑盒；激動劑/抑制劑；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡試劑盒；呼吸爆發(fā)試劑盒；ELISA試劑盒；重組蛋白；抗體: 二抗、標簽抗體、對照抗體；定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...
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