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          生化檢測│腎功能、肝功能、血糖、血脂檢測臨床意義及科學研究應用分享

          閱讀:408      發(fā)布時間:2024-5-23
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          一、背景介紹


          1、腎功能檢測指標及臨床意義


          肌酐 abs580199-96T

          臨床意義:血清肌酐濃度升高見于急慢性腎小球腎炎、急性或慢性腎功能不全等。血清肌酐濃度與肌肉量成比例,故肢端肥大癥巨人癥時,血清肌酊酐濃度升高;相反,肌肉萎suo性疾病時血清肌酐濃度可降低。透析治療前后血清肌酐測定可用于選擇透析指標,判斷透析治療效果。


          尿素氮(BUN) abs580197-96T

          臨床意義:尿素氮是機體蛋白質的代謝終末產物,是一項檢測腎小球的濾過功能的指標,一般在腎功能不全的失代償期時或氮質血癥時,血尿素氮會明顯升高。進行該項指標的測定,主要用于診斷器質性腎功能損害,例如各種原發(fā)性和繼發(fā)性腎小球腎炎、多囊腎、腎腫瘤等,還可以作為腎衰竭時透析的評估指標。


          尿酸 abs580057-96T

          臨床意義:尿酸是嘌呤代謝的終末產物,人類大部分來自鳥嘌呤,主要是經(jīng)腎小球濾過隨尿排出,腎功能減退時血清尿酸增高。尿酸可由腎小球濾過和腎小管排泌,但大部分被腎小管重吸收,最后僅排出濾過量的8%。尿酸增高:嚴重腎衰竭時可有部分尿酸從腎小管排泌,慢性尿毒癥時血清尿酸的增高程度不明顯。各種原因所致尿酸生成異常增多,如原發(fā)性或繼發(fā)性痛風者,血清尿酸可顯著增高。尿酸降低常見于惡性貧血、乳糜瀉及腎上腺皮質激素等藥物治療后。


          2、肝功能檢測指標及臨床意義


          谷丙轉氨酶(ALT) abs580002-96T

          臨床意義:人體中很多臟器都含有ALT,其分布大致為肝>腎>心>肌肉。肝內ALT活性遠遠超過其它臟器的活性,主要存在于肝細胞質的可溶性部分,故測定ALT反映肝臟損害具有特殊意義。血清ALT活性增高原因:急性病毒性肝炎;骨骼肌、腎臟及胰腺等組織壞死;伴有急性肝炎的傳染性單核細胞增多癥;嚴重心肌梗塞、心力衰竭時的肝郁血;膽道疾病、肝外癌性膽道梗阻性黃疸(如膽管癌、胰頭癌)、膽石癥、膽管炎及膽囊炎;應用銻劑、奎林、呋喃西林、利福平、某些避孕藥、苯巴妥等藥物,以及酒精、鉛、汞、四氯化碳等中毒;外科手術、麻醉、劇烈運動、早期妊娠等。


          谷草轉氨酶(AST) abs580004-96T

          臨床意義:臨床AST測定主要用于診斷急性心肌梗塞(AMI)、肝細胞及骨骼肌疾病。AMI發(fā)作后6-8h開始升高,24h達高峰,約3-5天恢復正常。升高還見于肺栓塞,充血性心力衰竭,病毒性肝炎,中毒性肝炎,肝硬化,肝癌(早期正常),膽道阻塞,溶血性疾病、骨骼肌疾病如進行性肌營養(yǎng)不良、皮肌炎(神經(jīng)性肌炎正常)、擠壓性肌肉損傷,壞疽,急性胰腺炎等。肝炎發(fā)病早期,由于肝AST含量高,往往血清AST/ALT>1,但由于ALT清除較慢,所以不久ALT>AST。恢復期一般也是ALT恢復較慢。ALT和AST持續(xù)升高,往往是慢性肝炎的指標。


          不同類型的肝炎患者AST/ALT比值


          肝臟疾病

          血液AST來源形式

          AST/ALT比值

          急性肝炎和輕度慢性肝炎

          肝細胞線粒體完整,AST主要從肝細胞胞漿內釋放

          <1

          重癥肝炎、中度和重度慢性肝炎

          肝細胞線粒體遭到嚴重破壞,AST從線粒體和胞漿內釋放

          ≈1

          肝硬化和肝癌患者

          肝細胞的破壞程度更加嚴重,線粒體也受到嚴重的破壞

          >1,甚至>2





          膽紅素  abs580147-96T

          臨床意義:總膽紅素是直接膽紅素和間接膽紅素的總和。血清總膽紅素的測定是肝、膽功能檢查中的一項重要檢測項目。血清直接膽紅素的升高,說明經(jīng)肝細胞處理后膽紅素從膽道的排泄發(fā)生障礙。直接膽紅素的測定有助于黃疸類型的診斷和鑒別診斷。直接膽紅素增高:主要見于阻塞性黃疸、肝細胞性黃疸、肝癌、胰頭癌、膽石癥、膽管癌等。間接膽紅素主要是由紅細胞破壞而來,未在肝內經(jīng)過葡萄糖醛酸化。間接膽紅素經(jīng)過肝臟代謝又可變?yōu)橹苯幽懠t素,隨膽汁排入膽道,最后經(jīng)大便排出。一般情況下間接膽紅素偏高往往預示著肝臟的病變。


          白蛋白  abs580137-96T & abs580138-96T

          臨床意義:白蛋白升高偶見于脫水所致的血液濃縮。白蛋白降低與總蛋白原因大致相同。急性降低見于大量出血與嚴重燒傷。慢性降低見于腎病蛋白尿、肝功能受損、腹水形成、腸道腫瘤與結核慢性失血、營養(yǎng)不良和消耗性疾病等。白蛋白如低于20g/L,臨床可出現(xiàn)水腫。


          3、血糖檢測指標及臨床意義


          葡萄糖 abs580025-96T

          臨床意義:空腹血糖升高/降低分為生理性增高和病理性增高。生理性血糖升高:多見于飽食或高糖飲食及劇烈運動后或情緒緊張等。

          病理性升高:

          a.糖尿?。?/span>

          b.其它內分泌疾病如甲亢、巨人癥或肢端肥大癥、腎上腺皮質功能亢進、嗜鉻細胞瘤等;

          c.肝硬化病人。生理性低血糖多見于饑餓和劇烈運動。

          病理性低血糖:

          a.對抗胰島素的激素分泌不足,如垂體前葉功能減退、腎上腺皮質功能減退和甲狀腺功能減退而使生長素、腎上腺皮質激素分泌減少;

          b.嚴重肝病患者,由于肝臟儲存糖原及糖異生等功能低下,肝臟不能有效地調節(jié)血糖。


          4、血脂檢測指標及臨床意義


          甘油三酯(TG) abs580085-96T

          臨床意義:現(xiàn)在認為甘油三酯也是冠心病發(fā)病的一個危險因素,當其升高時,也應該給予飲食控制或藥物治療。其升高可見于各種高脂蛋白血癥、糖尿病、痛風、梗阻、黃疸、甲狀腺功能低下、胰腺炎等。降低:見于低脂蛋白血癥、營養(yǎng)吸收不良、甲狀腺功能亢進、甲狀旁腺功能亢進,還可見于過度饑餓、運動等。


          總膽固醇(TC)  abs580114-96T

          臨床意義:膽固醇升高容易引起動脈粥樣硬化性心、腦血管疾病如冠心病、心肌梗死,腦卒中等。但如果作為一個診斷指標來說,它既不夠特異,也不夠敏感,所以不能作為診斷指標,只能作為評價動脈粥樣硬化的危險因素,而常用做動脈粥樣硬化的預防、發(fā)病估計、治療觀察等的參考指標。膽固醇升高:可見于各種高脂蛋白血癥、梗阻性黃疸、腎病綜合征、甲狀腺功能低下、慢性腎功能衰竭、糖尿病等時。此外,吸煙、飲酒、緊張、血液濃縮等也都可使血液膽固醇升高。妊娠末三個月時,可能明顯升高,產后恢復原有水平。膽固醇降低:可見于各種脂蛋白缺陷狀態(tài)、肝硬化、惡性腫瘤、營養(yǎng)吸收不良、巨細胞性貧血等。此外,女性月經(jīng)期也可降低。


          低密度脂蛋白 abs580113-96T

          臨床意義:低密度脂蛋白(LDL)升高可見于家族性高膽固醇血癥、家族性apoB缺陷癥、混合性高脂血癥、糖尿病、甲狀腺機能低下、腎病綜合征、梗阻性黃疸、慢性腎功能衰竭、妊娠、多發(fā)性肌瘤、某些藥物的使用等。遺傳性高脂蛋白血癥、甲狀腺功能低下、腎病綜合征、梗阻性黃疸、慢性腎功能衰竭、Cushing綜合征等。LDL升高是發(fā)生動脈粥樣硬化的重要危險因素之一,用于判斷是否存在患冠心病的危險性,也是血脂異常防治的首要指標。低密度脂蛋白降低:可見于家族性無β和低β-脂蛋白血癥、營養(yǎng)不良、甲狀腺機能亢進、消化吸收不良、肝硬化、慢性消耗疾病、惡性腫瘤、apoB合成減少等。


          高密度脂蛋白 abs580112-96T

          臨床意義:高密度脂蛋白(HDL)主要功能是將膽固醇從周圍組織細胞轉運到肝臟,代謝及排泄過多的膽固醇,以維持血漿正常膽固醇水平。其被譽為抗動脈粥樣硬化的血漿脂蛋白,是冠心病的保護因子。所以HDL水平低的個體患冠心病的危險性增加,其水平高者患冠心病的可能性小。降低:見于急、慢性肝病、急性應激反應(心肌梗塞、外科手術、損傷)、糖尿病、甲狀腺功能亢進或減低、慢性貧血等。

          注:來源搜狐,侵刪!


          二、常規(guī)腎、肝功能檢測在科學研究中的應用案例


          2023年6月17日,上海市第一婦嬰保健院生殖免疫科周倩主任醫(yī)生、中國科學院重慶綠色智能技術研究院于永生副研究員聯(lián)合重慶大學生物工程學院生物流變學教育部重點實驗室馮茜副教授團隊,在Acta Biomaterialia雜志上發(fā)表了題為“Functionalized human umbilical cord mesenchymal stem cells andinjectable HA/Gel hydrogel synergy in endometrial repair and fertility recovery"的研究論文。他們的研究表明,負載 hUCMSCs 的可注射水凝膠具有作為促進子宮內膜損傷快速恢復的有效治療策略的潛力,并且這種水凝膠是再生醫(yī)學應用的有前途的生物材料。


          生化檢測│腎功能、肝功能、血糖、血脂檢測臨床意義及科學研究應用分享

          圖1 功能化人臍帶間充質干細胞與可注射HA/Gel水凝膠在子宮內膜修復和生育能力恢復中的協(xié)同作用概述


          研究亮點:

          a.氧化透明質酸(HA-CHO)/酰肼接枝明膠(Gel-ADH)水凝膠聯(lián)合人臍帶間充質干細胞(hUCMSCs)可有效改善子宮內膜損傷大鼠模型的子宮內膜再生;

          b.hUCMSCs負載水凝膠治療通過MEK/ERK1/2信號通路促進子宮內膜VEGF的表達,調節(jié)炎癥因子的平衡;

          c.子宮內膜損傷大鼠模型胚胎著床率和活產率均恢復至正常水平,且水凝膠治療后對母鼠、胎兒及子代發(fā)育無不良影響。


          生化檢測│腎功能、肝功能、血糖、血脂檢測臨床意義及科學研究應用分享

          圖2  母鼠血清肌酐(abs580199-96T)、尿素氮、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶含量檢測評估腎和肝功能損傷情況


          接下來,小愛就以腎功能檢查指標肌酐檢測試劑盒為例,給大家詳細介紹使用方法。


          肌酐檢測試劑盒使用方法介紹


          一、試劑盒組分


          組分

          規(guī)格

          儲存條件

          96-Well Microplate

          1 plate

          Reaction Buffer

          20mL×1

          4℃

          Enzyme

          Powder×1

          -20℃,避光保存

          Dye Reagent

          Powder×1

          -20℃,避光保存

          Standard

          Powder×1

          4℃

          Plate Adhesive Strips

          3 Strips

          Technical Manual

          1 Manual





          二、操作步驟:


          1、材料和試劑準備

          自備材料:酶標儀(可在546nm處讀取吸光值)、蒸餾水、移液器與槍頭、研缽、離心機、計時器等。

          Enzyme:使用前加入9 mL Reaction Buffer 充分溶解。

          Dye Reagent:使用前加入10 mL Reaction Buffer充分溶解。

          Standard:使用前加入1mL蒸餾水溶解,然后取50 μL加入到950 μL蒸餾水中,獲得濃度為5 mmol/L的標準品溶液。


          2、樣本處理

          尿液、血清或血漿樣本:直接檢測。


          3、上樣及檢測

          使用前將所有試劑加熱至室溫,然后按照如下表格加樣。



          試劑

          標準品孔

          對照孔

          樣品孔

          Standard

          10μL

          -

          -

          Distilled water

          -

          10μL

          -

          Sample

          -

          -

          10μL

          Enzyme

          90μL

          90μL

          90μL

          Dye Reagent

          100μL

          100μL

          100μL

          混合均勻,放入37℃恒溫箱中孵育15min后,在546nm處測定吸光值。





          注:a.對于標準品,可進行2倍連續(xù)稀釋,制成標準曲線;

                b.對于未知的樣品,我們建議挑選幾個樣品進行預實驗,以確定樣品濃度和稀釋倍數(shù)。


          4、標準曲線

          標準曲線僅用于參考,每次實驗都必須做一條新的標準曲線。


          生化檢測│腎功能、肝功能、血糖、血脂檢測臨床意義及科學研究應用分享

          檢測范圍:0.05mmol/L-5mmol/L

          溫馨提示:本公司提供的試劑盒僅作科學研究使用,不支持臨床檢測。

          常見問題解答


          Q1:試劑盒中的96-Well Microplate只有一個,不夠實驗使用怎么辦?

          A1:該試劑盒中的96孔板是免費送的,后續(xù)實驗可以用常規(guī)的96孔酶標板代替。


          Q2:試劑盒操作說明書中既有標準曲線法又有公式法,我應該選擇哪種計算方式?

          A2:兩種方式任選一種就可以,公式是簡便算法,建議按照標曲計算,會更加準確。需要注意的是,使用標準曲線法,每次實驗必須重新繪制標準曲線。


          Q3:試劑盒一次用不完,最長能保存多久?

          A3:試劑盒中染料(Dye)溶解后易氧化變質,需要現(xiàn)配現(xiàn)用,不建議儲存。長期儲存可能影響顯色讀數(shù)進而影響檢測;如果樣本需要分批檢測,建議分批收樣儲存,待樣本收齊后統(tǒng)一檢測。此外,如因儲存時間過久或其他人為原因導致組分不夠使用,可與我司聯(lián)系單獨購買試劑盒組分。



          參考文獻


          [1] 楊柳易,王琛.有氧糖酵解對腎臟疾病影響的研究進展[J].中國中西醫(yī)結合腎病雜志, 2022,23(8):744-746.

          [2] Chang L, Li G, Jiang S, et al. 1-Pyrroline-5-carboxylate inhibit T cell glycolysis in prostate cancer microenvironment by SHP1/PKM2/LDHB axis[J]. Cell Commun Signal. 2024;22(1):101. Published 2024 Feb 8. doi:10.1186/s12964-024-01493-1

          常規(guī)生化功能檢查試劑盒推薦:


          檢測項目

          貨號

          產品名稱

          規(guī)格

          檢測范圍

          肝功能

          abs580002

          谷丙轉氨酶 (ALT)檢測試劑盒

          96T

          0.625 μmol/mL - 20 μmol/mL

          abs580004

          谷草轉氨酶 (AST)檢測試劑盒

          96T

          0.625 μmol/mL - 20 μmol/mL

          abs580137

          白蛋白(BCG)檢測試劑盒

          96T

          1 mg/mL - 100 mg/mL

          abs580138

          白蛋白(BCP)檢測試劑盒

          96T

          0.5 mg/mL - 50 mg/mL

          abs580147

          膽紅素檢測試劑盒

          96T

          1 μmol/L - 200 μmol/L

          腎功能

          abs580057

          尿酸檢測試劑盒

          96T

          0.04 mmol/L - 4 mmol/L

          abs580197

          尿素氮(BUN)檢測試劑盒

          96T

          0.05 mmol/L - 1 mmol/L

          abs580199

          肌酐檢測試劑盒

          96T

          0.02 mmol/L - 2 mmol/L

          血糖

          abs580025

          葡萄糖檢測試劑盒

          96T

          0.1 mmol/L - 10 mmol/L

          血脂

          abs580085

          甘油三酯(TG)檢測試劑盒

          96T

          4 μmol/L - 400 μmol/L

          abs580114

          總膽固醇(TC)檢測試劑盒

          96T

          0.05 mmol/L - 5 mmol/L

          abs580113

          低密度脂蛋白檢測試劑盒

          96T

          0.1 mmol/L - 10 mmol/L

          abs580112

          高密度脂蛋白檢測試劑盒

          96T

          0.1 mmol/L - 10 mmol/L






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